本文關(guān)鍵詞：利用CRISPRi干擾研究MyoG和Myf6基因?qū)ε９趋兰⌒l(wèi)星細(xì)胞分化的影響

  更多相關(guān)文章： MyoG Myf CRISPRi 牛 骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞 分化

【摘要】：CRISPR干擾(clustered regularly interspaced short palindromic repeat interference,CRISPRi)技術(shù)因高效的基因干擾效率而成為基因功能研究的重要工具。Myo G、Myf6基因是生肌調(diào)節(jié)因子家族(myogenic regulatory factors,MRFs)的重要成員,是骨骼肌分化所必需的調(diào)控因子。該研究以牛骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞為實驗材料,探討Myo G和Myf6基因在骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞分化過程中的相互關(guān)系。構(gòu)建Myo G、Myf6基因CRISPRi載體,分別轉(zhuǎn)染牛骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞,誘導(dǎo)其分化,Real-time PCR檢測肌肉分化重要功能基因Myo G、Myf6、MYH2、Myo D的表達情況。結(jié)果表明,在牛骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞分化期間,抑制Myo G基因表達將誘導(dǎo)Myf6基因的代償性升高,但并不能完全彌補Myo G基因的缺少對肌肉分化產(chǎn)生的影響,而抑制Myf6基因表達則不會引起Myo G基因表達升高,這為肌肉分化機制的闡明提供了理論依據(jù)。
【作者單位】： 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)實驗室;
【基金】：國家轉(zhuǎn)基因?qū)ｍ棥案弋a(chǎn)優(yōu)質(zhì)轉(zhuǎn)基因肉牛新品種培育”(批準(zhǔn)號:2014ZX08007-002)資助的課題~~
【分類號】：S823
【正文快照】： CRISPR(clustered regularly interspaced short pal-indromic repeat)技術(shù)作為繼ZFN(zinc fingernucleases)和TALEN(transcription activator-like effector nucleases)后的又一新的基因編輯手段,引起了越來越多研究者的重視。該技術(shù)的原理是核酸酶Cas9蛋白受到向?qū)NA(singl

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