液相芯片技術(shù)同時(shí)檢測六種豬繁殖障礙病毒的方法研究
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【摘要】:在GenBank中收集豬細(xì)小病毒(PPV)結(jié)構(gòu)蛋白VP2基因、豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)的ORF2序列、豬偽狂犬病毒(PRV)的gB基因、豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)的NSP2基因、豬瘟病毒(CSFV)的E2基因和乙型腦炎病毒(JEV)的M基因,利用Primer5.0等分子生物學(xué)軟件對收集的序列分析比較,篩選出上述基因的特異保守序列并設(shè)計(jì)引物和探針,將設(shè)計(jì)好的探針與相應(yīng)的微球偶聯(lián),優(yōu)化條件,建立檢測方法。結(jié)果表明:建立的檢測PPV、PCV2、PRV、PRRSV、CSFV、JEV6種病毒核酸的多重液相芯片技術(shù)具有較好的特異性、敏感性和穩(wěn)定性,對PPV、PCV2、PRV、PRRSV、CSFV、JEV6種病毒核酸的最低檢出量分別為8.50×10~2copies/μL、2.87×10~2copies/μL、2.07×10~2copies/μL、2.61×10~2copies/μL、2.34×10~2copies/μL、2.05×10~2copies/μL,與相應(yīng)病毒PCR/RT-PCR檢測方法相比,敏感性提高了100~1000倍;對臨床388份樣品同步進(jìn)行熒光PCR與液相芯片檢測,結(jié)果99.87%相符。本方法為液相芯片技術(shù)在動物多病毒快速高通量檢測、鑒別診斷等應(yīng)用方面奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 上海市動物疫病預(yù)防控制中心;
【分類號】:S851.3
【正文快照】: 隨著養(yǎng)豬業(yè)規(guī);图s化發(fā)展,豬繁殖障礙疫病已成為大中型豬場最重要的疫病之一。在引起豬繁殖障礙的諸多病原中,豬瘟病毒(CSFV)、豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)和日本腦炎病毒(JEV)是較為常見的RNA病毒,豬圓環(huán)病毒2型(PCV-2)、豬細(xì)小病毒(PPV)和豬偽狂犬病毒(PRV)被認(rèn)為是
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,本文編號:1141887
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