本文關鍵詞：H9和H6亞型禽流感病毒二重RT-PCR檢測方法的建立

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【摘要】：試驗旨在建立可同時鑒別檢測H9和H6亞型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)的二重RT-PCR方法。根據(jù)GenBank中H9和H6亞型AIV的HA基因保守序列,分別設計2對特異性引物,優(yōu)化引物濃度與退火溫度等條件,建立了可同時鑒別檢測H9和H6亞型AIV的二重RT-PCR檢測方法。用該法對H9和H6亞型AIV混合感染樣品、H9亞型AIV單一感染樣品和H6亞型AIV單一感染樣品進行擴增,結果均得到對應的目的條帶,而對其余亞型AIV及其他禽病病原體均未擴增出特異性條帶。該法對H9和H6亞型AIV的檢測下限均為5×104拷貝/μL。本研究建立的二重RT-PCR檢測方法特異性強、敏感性高、穩(wěn)定性和重復性良好,可同時鑒別檢測H9與H6兩種亞型AIV,為H9與H6亞型AIV的監(jiān)測提供技術支撐。
【作者單位】： 廣西師范大學生命科學學院;廣西壯族自治區(qū)獸醫(yī)研究所廣西獸醫(yī)生物技術重點實驗室;
【關鍵詞】： 禽流感病毒 H亞型 H亞型 二重RT-PCR
【基金】：國家“萬人計劃”領軍人才專項(2016-37-88) 廣西科技項目(2013GXNSFDA019015、AD163800009、14123001-8) 廣西水產(chǎn)畜牧局科研項目(桂漁牧科201204930、201452001)
【分類號】：S852.65
【正文快照】： 禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)屬于正黏病毒科、A型流感病毒屬。根據(jù)AIV表面的血凝素蛋白(hemagglutinin,HA)和神經(jīng)氨酸酶蛋白(neuraminidase,NA)抗原的差異可劃分為18種HA亞型(H1~H18)和10種NA亞型(N1~N10)[1-4]。另外,根據(jù)病毒對雞致病性的強弱又可將其分為低致病

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