本文關(guān)鍵詞：H9和H6亞型禽流感病毒二重RT-PCR檢測(cè)方法的建立

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【摘要】：試驗(yàn)旨在建立可同時(shí)鑒別檢測(cè)H9和H6亞型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)的二重RT-PCR方法。根據(jù)GenBank中H9和H6亞型AIV的HA基因保守序列,分別設(shè)計(jì)2對(duì)特異性引物,優(yōu)化引物濃度與退火溫度等條件,建立了可同時(shí)鑒別檢測(cè)H9和H6亞型AIV的二重RT-PCR檢測(cè)方法。用該法對(duì)H9和H6亞型AIV混合感染樣品、H9亞型AIV單一感染樣品和H6亞型AIV單一感染樣品進(jìn)行擴(kuò)增,結(jié)果均得到對(duì)應(yīng)的目的條帶,而對(duì)其余亞型AIV及其他禽病病原體均未擴(kuò)增出特異性條帶。該法對(duì)H9和H6亞型AIV的檢測(cè)下限均為5×104拷貝/μL。本研究建立的二重RT-PCR檢測(cè)方法特異性強(qiáng)、敏感性高、穩(wěn)定性和重復(fù)性良好,可同時(shí)鑒別檢測(cè)H9與H6兩種亞型AIV,為H9與H6亞型AIV的監(jiān)測(cè)提供技術(shù)支撐。
【作者單位】： 廣西師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;廣西壯族自治區(qū)獸醫(yī)研究所廣西獸醫(yī)生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 禽流感病毒 H亞型 H亞型 二重RT-PCR
【基金】：國(guó)家“萬(wàn)人計(jì)劃”領(lǐng)軍人才專項(xiàng)(2016-37-88) 廣西科技項(xiàng)目(2013GXNSFDA019015、AD163800009、14123001-8) 廣西水產(chǎn)畜牧局科研項(xiàng)目(桂漁牧科201204930、201452001)
【分類號(hào)】：S852.65
【正文快照】： 禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)屬于正黏病毒科、A型流感病毒屬。根據(jù)AIV表面的血凝素蛋白(hemagglutinin,HA)和神經(jīng)氨酸酶蛋白(neuraminidase,NA)抗原的差異可劃分為18種HA亞型(H1~H18)和10種NA亞型(N1~N10)[1-4]。另外,根據(jù)病毒對(duì)雞致病性的強(qiáng)弱又可將其分為低致病

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1112659