傳染性囊病病毒VP5蛋白單克隆抗體的制備及鑒定
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【摘要】:傳染性囊病病毒(Infectious Bursal Disease Virus,IBDV)的非結(jié)構(gòu)蛋白VP5在病毒感染細(xì)胞的不同階段發(fā)揮著抑制或誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的重要作用。為制備抗血清I型IBDV VP5蛋白的單克隆抗體,取經(jīng)His-VP5蛋白免疫4次的BALB/c小鼠的脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞(SP2/0)進(jìn)行融合,3次亞克隆后獲得2株能穩(wěn)定分泌VP5蛋白單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株,分別命名為5EC7和2BE5。經(jīng)間接ELISA測定,以上2株單抗的親和力解離常數(shù)分別為1.14×10~(-10)和4.87×10~(-10),亞類分別為Ig G2a和Ig G1。通過Western Blot和間接免疫熒光試驗檢測,2株單抗均能識別IBDV感染DF-1細(xì)胞后產(chǎn)生的VP5蛋白。Western Blot試驗表明,2株單抗識別的抗原表位區(qū)域為VP5 N-端的1~10 aa。該單抗為研究血清I型IBDV VP5蛋白的生物學(xué)功能及病毒致病機(jī)理奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】: 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院農(nóng)業(yè)生物技術(shù)國家重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】: 傳染性囊病病毒 VP蛋白 原核表達(dá) 單克隆抗體
【基金】:國家自然科學(xué)基金(31272543) 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項資金(NYCYTX-41)
【分類號】:S852.65
【正文快照】: 傳染性囊病(Infectious Bursal Disease,IBD)是一種以危害雛雞為主的急性、高度傳染性的免疫抑制性疾病,其病原為傳染性囊病病毒(IBDV)。IB-DV能損傷B淋巴細(xì)胞前體,誘導(dǎo)其凋亡,抑制機(jī)體體液免疫應(yīng)答,從而誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生免疫抑制[1],使病禽易繼發(fā)感染其他病原,給養(yǎng)殖業(yè)帶來嚴(yán)重的
【參考文獻(xiàn)】
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【相似文獻(xiàn)】
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,本文編號:1079419
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