豬鏈球菌2型實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測方法的建立與應(yīng)用
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更多相關(guān)文章: 豬鏈球菌型 實(shí)時(shí)熒光定量PCR 敏感性 特異性 重復(fù)性
【摘要】:試驗(yàn)根據(jù)豬鏈球菌2型莢膜多糖(CPS)抗原設(shè)計(jì)CPS2J基因特異性引物,建立豬鏈球菌2型實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測方法。結(jié)果顯示,該方法的標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=-3.073x+36.87,r=0.995,熔解曲線只有單一的特異峰。敏感性試驗(yàn)顯示,該方法可以檢測出模板最低濃度為1.0×101拷貝/μL,是普通PCR的10倍;特異性試驗(yàn)顯示,對豬鏈球菌2型具有良好的特異性,能夠區(qū)分其他血清型豬鏈球菌和其他細(xì)菌;重復(fù)性試驗(yàn)變異系數(shù)為0.37%~0.63%,均低于2.5%。臨床檢測顯示該方法的敏感性明顯高于常規(guī)PCR方法和細(xì)菌分離的方法。以上結(jié)果表明,本研究建立的方法敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好,有利于對豬鏈球菌2型的快速檢測。
【作者單位】: 青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所;山東濱州沃華生物工程有限公司;
【關(guān)鍵詞】: 豬鏈球菌型 實(shí)時(shí)熒光定量PCR 敏感性 特異性 重復(fù)性
【基金】:泰山學(xué)者特聘專家工程經(jīng)費(fèi) 山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(SDAIT) 山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院重大科技成果培育計(jì)劃(2014CGPY04);山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院青年科研基金(2015YQN51);山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新工程項(xiàng)目(CXGC2016B14) 山東省農(nóng)業(yè)重大應(yīng)用技術(shù)創(chuàng)新項(xiàng)目 山東省自然科學(xué)基金(ZR2015YL078)
【分類號】:S852.611
【正文快照】: 豬鏈球菌(Streptococcus suis)是一種危害嚴(yán)重的人獸共患病病原菌,臨床上以引起豬腦膜炎、關(guān)節(jié)炎、心內(nèi)膜炎、敗血癥和突發(fā)死亡等癥狀為主。至今,已鑒定出35個(gè)血清型(1~34型及1/2型)[1]。引起豬發(fā)病的主要血清型是1、2、7、9型,其中2型不僅致病性強(qiáng),而且流行較為廣泛。1991年
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,本文編號:1038477
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