本文關(guān)鍵詞：屠宰前雞豬源大腸桿菌耐藥性和β-內(nèi)酰胺酶基因調(diào)查研究

  更多相關(guān)文章： 大腸埃希菌 耐藥性 ESBLs AmpC

【摘要】：大腸桿菌作為一個(gè)食品細(xì)菌污染指示菌和機(jī)體(環(huán)境)耐藥性指示菌,在研究耐藥性通過(guò)食物鏈方式在動(dòng)物與人之間傳遞的作用及風(fēng)險(xiǎn)越來(lái)越引起大家的重視。屠宰前動(dòng)物作為動(dòng)物從飼養(yǎng)環(huán)節(jié)到餐桌中重要的一環(huán),該過(guò)程如果控制不嚴(yán)格有可能將動(dòng)物中的耐藥大腸桿菌傳遞到人。革蘭氏陰性菌對(duì)頭孢菌素類藥物最主要的耐藥機(jī)制包括產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)和Amp Cβ-內(nèi)酰胺酶(Amp C)。本文主要通過(guò)檢測(cè)屠宰豬雞所攜帶大腸埃希菌的耐藥性及其β-內(nèi)酰胺酶基因流行情況,為控制耐藥性通過(guò)食物鏈傳遞提供依據(jù)。采用麥康凱腸桿菌科選擇性培養(yǎng)基分離、染色鏡檢和生化鑒定的方法對(duì)2013年~2015年采集自屠宰前的豬雞樣本進(jìn)行大腸埃希菌分離鑒定,分離得到772株豬源和240株雞源大腸埃希菌。采用瓊脂稀釋法測(cè)定1012株大腸埃希菌對(duì)18種抗生素的耐藥性。結(jié)果顯示豬源菌株對(duì)亞胺培南耐藥率為0%,對(duì)頭孢他啶、阿米卡星、頭孢噻肟和安普霉素的耐藥率也較低,分別為1.2%、1.5%、5.7%和6.6%。耐藥性最嚴(yán)重的為磺胺甲VA唑/甲氧芐啶和四環(huán)素兩種藥物,耐藥率分別為87.9%和82.7%,其他耐藥較為嚴(yán)重的還包括氨芐西林(79.8%)、多西環(huán)素(79.8%)、氯霉素(71.4%)、氟苯尼考(69.5%)和鏈霉素(65.3%)。除個(gè)別抗生素(氨芐西林、頭孢喹肟和磺胺甲VA唑/甲氧芐啶)外,所有受試抗生素均從2013年到2015年之間表現(xiàn)出不同程度的耐藥性上升,其中環(huán)丙沙星從2013年的17.9%上升到2015年的37.4%,多西環(huán)素從2014年的73.5%上升到2015年的90.5%。通過(guò)分析772株E.coli對(duì)受試抗生素耐藥種類數(shù),發(fā)現(xiàn)隨著年代的推移,大腸埃希菌表現(xiàn)出對(duì)越來(lái)越多的抗生素產(chǎn)生耐藥性。雞源分離株MIC結(jié)果基本與豬源的相似,對(duì)頭孢他啶(15.4%)和頭孢噻肟(31.2%)的耐藥率高于豬源,對(duì)黏菌素(4.6%)的耐藥率低于豬源分離株(23.1%)。采用PCR檢測(cè)和序列測(cè)定比對(duì)分析的方法對(duì)772株豬源菌株和240株雞源菌株進(jìn)行5種ESBLs和Amp C基因的檢測(cè)和分析。PCR結(jié)果顯示豬源大腸埃希菌bla~(CTX-M-9G)為主要的ESBLs型,檢測(cè)率為2.7%,其次為bla~(CTX-M-1G),檢測(cè)率為1.9%,bla~(CMY-2)檢測(cè)率僅為0.3%。未檢出到bla~(SHV)和bla~(DHA)。共有4種bla~( CTX-M)基因型,其中檢出率最高的為bla~( CTX-M-55)(1.9%,16/772),其他依次為bla~( CTX-M-14)(1.7%,10/772)、bla~( CTX-M-65)(0.8%,5/772)和bla~( CTX-M-24)(0.2%,1/772)。雞源大腸埃希菌中,bla~( CTX-M-55)檢出率最高,為13.4%,其次為bla~(CTX-M-65)(5.8%,14/240)和bla~(CTX-M-14)(1.5%,4/240),還檢測(cè)到bla~( CTX-M-15)(n=1)、bla~( CTX-M-24)(n=2)和bla~( CTX-M-121)(n=1)。通過(guò)對(duì)比攜帶β-內(nèi)酰胺酶基因和不攜帶β-內(nèi)酰胺酶基因的菌株對(duì)18種抗生素的耐藥性,發(fā)現(xiàn)除多西環(huán)素和阿米卡星外,攜帶β-內(nèi)酰胺酶基因的大腸埃希菌對(duì)抗菌藥表現(xiàn)出更高的耐藥率。綜上所述,從屠宰前豬雞分離的大腸埃希菌總體表現(xiàn)出很高的耐藥水平,同時(shí)部分ESBL基因已在這些菌株中廣泛流行。屠宰前動(dòng)物攜帶的耐藥菌和耐藥基因存在通過(guò)食物鏈傳播給人的風(fēng)險(xiǎn),因此有必要加強(qiáng)該方面的調(diào)查以更好地控制耐藥性傳播。
【關(guān)鍵詞】：大腸埃希菌 耐藥性 ESBLs AmpC
【學(xué)位授予單位】：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S852.61
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-11
• 1 前言11-16
• 1.1 大腸埃希菌耐藥性現(xiàn)狀11-12
• 1.2 ESBLs12-14
• 1.2.1 TEM型ESBLs12-13
• 1.2.2 OXA型ESBLs13
• 1.2.3 SHV型ESBLs13-14
• 1.2.4 CTX-M型ESBLs14
• 1.3 AmpC酶（pAmpC）的分類14
• 1.4 質(zhì)粒介導(dǎo)的ESBLs、AmpC的流行狀況14-16
• 1.5 本研究的目的意義16
• 2 材料與方法16-26
• 2.1 材料16-18
• 2.1.1 菌株來(lái)源16
• 2.1.2 質(zhì)控菌16
• 2.1.3 藥物16-17
• 2.1.4 培養(yǎng)基17
• 2.1.5 主要試劑17
• 2.1.6 主要儀器設(shè)備17-18
• 2.2 方法18-26
• 2.2.1 細(xì)菌的分離和鑒定18-19
• 2.2.2 瓊脂稀釋法檢測(cè)藥物敏感性19-21
• 2.2.3 β-內(nèi)酰胺酶耐藥基因的檢測(cè)21-26
• 3 結(jié)果與分析26-38
• 3.1 細(xì)菌的分離鑒定26-27
• 3.2 藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果27-34
• 3.3 ESBLs檢測(cè)結(jié)果34-36
• 3.4 ESBLs基因的測(cè)序分析36-37
• 3.5 產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌藥敏結(jié)果37-38
• 4 討論38-42
• 4.1 雞豬源大腸埃希菌耐藥情況38-39
• 4.2 雞豬源大腸埃希菌ESBLs流行情況39-41
• 4.3 雞豬源產(chǎn)ESBLs分離株的耐藥情況41-42
• 5 全文小結(jié)42-43
• 致謝43-44
• 參考文獻(xiàn)44-52

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 宋立;范學(xué)政;張純萍;商軍;岳秀英;李欣南;曲志娜;吳荔琴;吳惠明;寧宜寶;;我國(guó)動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性數(shù)據(jù)庫(kù)的建立與應(yīng)用[J];中國(guó)獸藥雜志;2015年08期

2 王笑梅;田國(guó)彬;廖明;劉爵;邵華斌;崔紅玉;;2014世界肉雞疫病控制研究和技術(shù)發(fā)展報(bào)告[J];中國(guó)家禽;2015年10期

3 何瑩;于藹玲;黃柳;馮啟凡;王子豪;薛原;柴龍會(huì);張彥龍;孫穎;;豬源大腸桿菌耐藥性的檢測(cè)與分析[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2015年03期

4 王基偉;孫洋;紀(jì)雪;劉軍;祝令偉;周偉;佟盼盼;郭學(xué)軍;李曉慧;馮書(shū)章;;長(zhǎng)春地區(qū)豬源大腸桿菌的分離鑒定和耐藥性分析[J];中國(guó)獸藥雜志;2014年11期

5 郭瀟木;楊銅;賀丹丹;饒麗麗;劉健華;曾振靈;;廣東地區(qū)豬源大腸桿菌耐藥性及其系統(tǒng)發(fā)育群的研究[J];中國(guó)畜牧獸醫(yī);2014年01期

6 賀丹丹;黃良宗;陳孝杰;楊銅;饒麗麗;羅東妹;陳佩玲;彭輝;劉健華;;不同動(dòng)物源大腸桿菌的耐藥性調(diào)查[J];中國(guó)畜牧獸醫(yī);2013年10期

7 王素春;莊青葉;李金平;蔣文明;侯廣宇;劉朔;黃保續(xù);陳繼明;韓先杰;;2011—2012年我國(guó)細(xì)菌性禽病臨床信息調(diào)查分析[J];中國(guó)動(dòng)物檢疫;2013年05期

8 劉保光;其布;次仁旦巴;謝俊生;旦增巴桑;才旦多吉;;西藏地區(qū)藏雞細(xì)菌病的流行病學(xué)調(diào)查及病因分析[J];中國(guó)動(dòng)物保健;2013年03期

9 鄒立扣;蒲妍君;楊莉;劉春華;肖平;羅燕;李蓓;;四川省豬肉源大腸桿菌和沙門氏菌的分離與耐藥性分析[J];食品科學(xué);2012年13期

10 劉書(shū)亮;張曉利;韓新鋒;王小蘭;;動(dòng)物性食品源大腸桿菌耐藥性研究[J];中國(guó)食品學(xué)報(bào);2011年07期

，

本文編號(hào)：1033974