豬圓環(huán)病毒2型誘導(dǎo)PK-15細(xì)胞產(chǎn)生IFN-β的信號通路研究
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【摘要】:【目的】研究豬圓環(huán)病毒2型(porcine circovirus type2,PCV2)感染PK-15細(xì)胞后調(diào)控β-干擾素(interferon-β,IFN-β)生成的信號通路,為豬圓環(huán)病毒病的發(fā)生機(jī)理和防治提供理論基礎(chǔ)。【方法】將PK-15細(xì)胞隨機(jī)分成5組:對照組、PCV2組、BX795(TBK1/IKKε抑制劑)組、BAY 11-7082(NF-κB抑制劑)組和BX795+BAY11-7082(混合抑制劑)組。BX795組、BAY 11-7082組、BX795+BAY 11-7082組分別用0.5μmol BX795、5μmol BAY11-7082、0.5μmol BX795+5μmol BAY 11-7082預(yù)先處理1 h,然后感染PCV2。于感染后3、12、24、48和72 h收集細(xì)胞,提取RNA。用熒光定量PCR檢測IFN-β、模式識別受體(TLR3、TLR9、RIG-1、MDA-5、DAI)、接頭蛋白(TRIF、MyD88、Sting、MAVS、IRF3)的mRNA 含量!窘Y(jié)果】PCV2感染PK-15細(xì)胞后,IFN-β的mRNA 含量在48、72 h顯著升高(P0.01),表明PCV2感染可以誘導(dǎo)PK-15細(xì)胞生成IFN-β;TLR3的mRNA 含量在48 h顯著升高(P0.01),TLR9的表達(dá)量在48、72 h顯著升高(P0.01);TLR3和TLR9下游的接頭蛋白MyD88和TRIF的mRNA 含量在48 h顯著升高(P0.01),表明PCV2激活了Toll樣受體介導(dǎo)的NF-κB信號途徑;MDA-5的mRNA 含量在48、72 h顯著升高(P0.01),RIG-1的mRNA 含量在72 h顯著升高(P0.01),MDA-5和RIG-1下游的接頭蛋白MAVS、Sting、IRF3的mRNA 含量在48 h顯著升高(P0.01),表明PCV2激活了RIG-1樣受體介導(dǎo)的IRF3信號途徑;DAI的mRNA 含量在48、72 h顯著升高(P0.01),表明PCV2亦激活了DNA模式識別受體介導(dǎo)的IRF3信號途徑;分別用BX795和BAY 11-7082抑制IRF3和NF-κB介導(dǎo)的信號通路,結(jié)果顯示NF-κB抑制劑組的IFN-β的mRNA 含量與PCV2組相比無顯著性差異(P0.05),TBK1/IKKε抑制劑組的IFN-β的mRNA 含量與PCV2組相比明顯下降(P0.05),表明PCV2誘導(dǎo)IFN-β的產(chǎn)生主要由IRF3信號途徑調(diào)控!窘Y(jié)論】PCV2感染可以誘導(dǎo)PK-15細(xì)胞中IFN-β表達(dá)量的上調(diào),其上調(diào)主要與IRF3信號通路有關(guān)。
【作者單位】: 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: PCV PK-細(xì)胞 IFN-β 信號通路 接頭蛋白
【基金】:國家自然科學(xué)基金(31101786) 江蘇省自然科學(xué)基金(BK2011646) 中央高校基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金(KYZ201629)
【分類號】:S852.651
【正文快照】: 0引言【研究意義】豬圓環(huán)病毒2型(porcine circovirustype2,PCV2)自1997年發(fā)現(xiàn)以來,已在世界各地廣泛傳播,給養(yǎng)豬行業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失,引起了國內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注。先天性免疫是機(jī)體抵抗病原微生物入侵的第一道防線,同時(shí)先天性免疫也會影響獲得性免疫。因此,研究PCV2感
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,本文編號:1025343
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