本文關(guān)鍵詞：應(yīng)用母體外周血中游離DNA鑒定細(xì)毛羊胎兒性別研究

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【摘要】：本研究針對(duì)不同妊娠時(shí)期細(xì)毛羊進(jìn)行胎兒性別鑒定工作。首先對(duì)外周血漿/血清分別采用加熱法和酚-氯仿法提取游離DNA。通過(guò)普通PCR擴(kuò)增雄性性別決定基因(sex determining region Y,SRY)和β-actin檢測(cè)基因的目的片段。鑒于部分樣品未擴(kuò)增出SRY基因目的片段,設(shè)計(jì)2對(duì)內(nèi)外引物,運(yùn)用優(yōu)化后的巢式PCR體系再次針對(duì)SRY目的基因展開(kāi)特異性擴(kuò)增。最后對(duì)每個(gè)妊娠時(shí)間段的鑒定結(jié)果和實(shí)際生產(chǎn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì),計(jì)算準(zhǔn)確率。結(jié)果表明:加熱法和酚-氯仿法均成功分離提取出妊娠母羊外周血漿/血清中的游離DNA,并擴(kuò)增出β-actin檢測(cè)基因片段;SRY陽(yáng)性樣本擴(kuò)增出了SRY目的基因片段和β-actin檢測(cè)基因片段,SRY陰性樣本只擴(kuò)增出了β-actin檢測(cè)基因片段;性別鑒定的平均準(zhǔn)確率達(dá)到81.25%(19.5/24),SRY基因檢出率與妊娠時(shí)間的長(zhǎng)短呈正比。結(jié)論,本研究建立了一種基于外周血游離DNA檢測(cè)細(xì)毛羊胎兒性別的非創(chuàng)傷性且高效低廉的產(chǎn)前診斷技術(shù),但性別鑒定的準(zhǔn)確率還有待提高。
【作者單位】： 新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院;新疆絨毛用羊遺傳育種與繁殖實(shí)驗(yàn)室;新疆畜牧科學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 細(xì)毛羊 外周血游離DNA SRY 性別鑒定
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(31360543、31460593) 農(nóng)業(yè)部體系項(xiàng)目(CARS-40) 新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)產(chǎn)學(xué)研聯(lián)合培養(yǎng)研究生示范基地項(xiàng)目(xjaucxy-yjs-20152012)
【分類號(hào)】：S826
【正文快照】： 綿羊早期妊娠診斷和胎兒性別鑒定是監(jiān)測(cè)移植效果的重要指標(biāo),也是做好妊娠管理的重要措施[1]。傳統(tǒng)的創(chuàng)傷性產(chǎn)前診斷方法(羊膜穿刺、絨毛膜取樣)不僅對(duì)妊娠母體和胎兒造成傷害,而且增加了胎兒流產(chǎn)的概率,因此建立一種非創(chuàng)傷性的產(chǎn)前診斷方法非常必要。妊娠母體的外周血中含有屬

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本文編號(hào)：1023504