本文關鍵詞：應用母體外周血中游離DNA鑒定細毛羊胎兒性別研究

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【摘要】：本研究針對不同妊娠時期細毛羊進行胎兒性別鑒定工作。首先對外周血漿/血清分別采用加熱法和酚-氯仿法提取游離DNA。通過普通PCR擴增雄性性別決定基因(sex determining region Y,SRY)和β-actin檢測基因的目的片段。鑒于部分樣品未擴增出SRY基因目的片段,設計2對內(nèi)外引物,運用優(yōu)化后的巢式PCR體系再次針對SRY目的基因展開特異性擴增。最后對每個妊娠時間段的鑒定結果和實際生產(chǎn)結果進行統(tǒng)計,計算準確率。結果表明:加熱法和酚-氯仿法均成功分離提取出妊娠母羊外周血漿/血清中的游離DNA,并擴增出β-actin檢測基因片段;SRY陽性樣本擴增出了SRY目的基因片段和β-actin檢測基因片段,SRY陰性樣本只擴增出了β-actin檢測基因片段;性別鑒定的平均準確率達到81.25%(19.5/24),SRY基因檢出率與妊娠時間的長短呈正比。結論,本研究建立了一種基于外周血游離DNA檢測細毛羊胎兒性別的非創(chuàng)傷性且高效低廉的產(chǎn)前診斷技術,但性別鑒定的準確率還有待提高。
【作者單位】： 新疆農(nóng)業(yè)大學動物科學學院;新疆絨毛用羊遺傳育種與繁殖實驗室;新疆畜牧科學院;
【關鍵詞】： 細毛羊 外周血游離DNA SRY 性別鑒定
【基金】：國家自然科學基金(31360543、31460593) 農(nóng)業(yè)部體系項目(CARS-40) 新疆農(nóng)業(yè)大學產(chǎn)學研聯(lián)合培養(yǎng)研究生示范基地項目(xjaucxy-yjs-20152012)
【分類號】：S826
【正文快照】： 綿羊早期妊娠診斷和胎兒性別鑒定是監(jiān)測移植效果的重要指標,也是做好妊娠管理的重要措施[1]。傳統(tǒng)的創(chuàng)傷性產(chǎn)前診斷方法(羊膜穿刺、絨毛膜取樣)不僅對妊娠母體和胎兒造成傷害,而且增加了胎兒流產(chǎn)的概率,因此建立一種非創(chuàng)傷性的產(chǎn)前診斷方法非常必要。妊娠母體的外周血中含有屬

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本文編號：1023504