本文關(guān)鍵詞：重組鵝β-防御素7蛋白的原核表達及其生物學(xué)特性分析

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【摘要】：為探討鵝β-防御素7(Av BD7)的生物學(xué)特性,將鵝Av BD7基因亞克隆到大腸桿菌原核表達載體p Pro EX HTa的EcoRⅠ和XhoⅠ雙酶切位點上,構(gòu)建重組表達質(zhì)粒p Pro EX-Av BD7,將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌Rosetta感受態(tài)細胞中,用異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)對其菌液進行誘導(dǎo)表達。經(jīng)N-三(羥甲基)甲基甘氨酸十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳(Tricine-SDS-PAGE)分析,該重組蛋白大小為10~15 ku,與預(yù)期大小結(jié)果一致。重組鵝Av BD7蛋白純化后,通過菌落計數(shù)的方法測定其體外抗大腸桿菌、雞白痢沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、四聯(lián)球菌、枯草芽孢桿菌等抑菌活性,鹽離子濃度對其抗菌活性的影響及其對雞紅細胞的溶血活性。結(jié)果顯示,重組鵝Av BD7蛋白對所測定的5種細菌均有顯著抗菌活性(P0.05),且其抑菌活性隨蛋白濃度的增加而增強。高濃度鹽離子(150 mmol/L)顯著抑制重組鵝Av BD7蛋白的抗菌活性(P0.05)。重組鵝Av BD7蛋白對雞紅細胞沒有溶血活性(P0.05)。由此可見,重組鵝Av BD7蛋白具有廣譜抗菌活性,高濃度鹽離子顯著降低其抗菌活性,且該重組蛋白不具有溶血活性。
【作者單位】： 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 鵝β-防御素 重組蛋白 抗菌活性
【基金】：教育部博士點基金項目(20122325110016) 哈爾濱市科技創(chuàng)新人才研究專項資金項目(2013RFXXJ019) 黑龍江省應(yīng)用技術(shù)研究與開發(fā)計劃項目(PC13S02)
【分類號】：S852.2
【正文快照】： 自抗生素被廣泛應(yīng)用于養(yǎng)殖業(yè)以來,其對維持畜禽健康、提高生產(chǎn)性能方面發(fā)揮了巨大作用。然而隨著抗生素在養(yǎng)殖業(yè)中大量使用,抗生素所產(chǎn)生的副作用越來越受到生產(chǎn)者和消費者的關(guān)注。迫切需要一種既有效又環(huán)保的新方法或新產(chǎn)品來控制畜禽疾病,改善畜禽產(chǎn)品品質(zhì)。防御素為參與機

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10 周財源;藺麗娟;韓宗璽;邵昱昊;劉勝旺;馬得瑩;;一個新的禽β-防御素,鵝β-防御素5基因克隆與生物學(xué)特性的初步分析[A];第六次全國飼料營養(yǎng)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2010年

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