發(fā)布時間：2017-10-06 20:18

  本文關(guān)鍵詞：兩種提取銅綠假單胞菌外膜囊泡的方法比較

  更多相關(guān)文章： 銅綠假單胞菌 外膜囊泡 超濾濃縮 密度梯度離心 外毒素A IL-

【摘要】：目的對兩種方法提取的銅綠假單胞菌(PA)的外膜囊泡(OMV)的純度、產(chǎn)量及外毒素A(ETA)含量進行比較。方法分別采取超濾濃縮法和Optiprep密度梯度離心法提取PA的OMV,負(fù)染電鏡檢測形態(tài)及純度;BCA法檢測兩種方法提取的OMV產(chǎn)量并用Western blotting對OMV中所含ETA進行比較;建立OMV感染人肺癌上皮細(xì)胞A549模型并檢測IL-8表達水平。結(jié)果超濾濃縮法提取的OMV中存在明顯的細(xì)胞碎片、鞭毛等雜質(zhì),產(chǎn)量為21.3μg/1010個細(xì)菌,密度梯度離心提取的OMV無明顯雜質(zhì)存在,產(chǎn)量為48.7μg/1010個細(xì)菌;相比于超濾濃縮法,密度梯度離心法提取的OMV中含有更高濃度的ETA且誘導(dǎo)A549細(xì)胞產(chǎn)生更高水平的IL-8。結(jié)論 Optiripe密度梯度離心法提取的PA的OMV的產(chǎn)量和純度和ETA含量以及激活宿主細(xì)胞炎性應(yīng)答的能量均高于超濾濃縮法。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院重慶市兒童發(fā)育重大疾病診治與預(yù)防國際科技合作基地兒科學(xué)重慶市重點實驗室兒童發(fā)育疾病研究省部共建教育部重點實驗室;重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院新生兒科;
【關(guān)鍵詞】： 銅綠假單胞菌 外膜囊泡 超濾濃縮 密度梯度離心 外毒素A IL-
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81071417/H2002)~~
【分類號】：R378.991
【正文快照】： 細(xì)菌的外膜囊泡(out membrane vesicle,OMV)是細(xì)菌表面分泌的雙層球形結(jié)構(gòu)[1],早在20世紀(jì)60年代,OMV就被發(fā)現(xiàn)存在于大腸桿菌的培養(yǎng)基中,但很長一段時間內(nèi)大家都只是把它當(dāng)作細(xì)菌的一個正常的代謝產(chǎn)物,直到最近,OMV的生物學(xué)功能的研究才逐漸成為了熱點[2]。細(xì)菌通過釋放膜囊泡

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

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【相似文獻】

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3 早報記者 李yN 實習(xí)生 劉笑;“泛耐藥菌早就存在于周圍”[N];東方早報;2010年

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5 特約記者 曉嘉;超級細(xì)菌：來勢兇猛 并非無敵[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2011年

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10 王s，

本文編號：984817