本文關鍵詞：一步法多重熒光定量RT-PCR檢測人杯狀病毒的建立及應用

  更多相關文章： 人杯狀病毒 札如病毒 諾如病毒 一步法多重熒光定量聚合酶鏈反應

【摘要】：目的建立檢測人杯狀病毒(human calicivirus,HuCVs,主要包括SV、NoV-GⅠ和NoV-GⅡ)的一步法多重熒光定量RTPCR(rRT-PCR)法。方法用Primer Express 3.0軟件設計特異性引物和探針,通過合成的對應病毒基因的質粒來評價該方法的靈敏度、特異性和重復性,檢測臨床標本并對陽性結果進行基因測序驗證。結果建立的rRT-PCR法檢測SV、NoV-GⅠ和NoV-GⅡ的靈敏度均達到103copies/mL,特異性為100%,且變異系數(CV)均≤1.275%。HuCVs檢出率為21.43%(75/350),其中SV、NoV-GⅠ和NoV-GⅡ分別為14.67%(11/75)、21.33%(16/75)和64.00%(48/75)。隨機選擇檢測陽性結果進行測序,結果均與該法檢測結果一致。結論建立的rRT-PCR法可同時檢測并區(qū)分SV、NoV-GⅠ和NoV-GⅡ病毒,可用于HuCVs引起的急性腹瀉散發(fā)和暴發(fā)疫情的監(jiān)測。
【作者單位】： 浙江大學醫(yī)學院;浙江中醫(yī)藥大學附屬第一醫(yī)院檢驗科;浙江大學醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院檢驗科;浙江大學醫(yī)學院附屬第二醫(yī)院檢驗科;
【關鍵詞】： 人杯狀病毒 札如病毒 諾如病毒 一步法多重熒光定量聚合酶鏈反應
【基金】：浙江省醫(yī)藥衛(wèi)生科技計劃項目(2012kyb142)
【分類號】：R373
【正文快照】： 人杯狀病毒(human calicivirus,HuCVs)包括兩個屬:諾如病毒屬(norovirus,NoV)和札如病毒屬(sapovirus,SV),而SV、NoV-GⅠ和NoV-GⅡ亞型是導致人類發(fā)生急性腹瀉的散發(fā)或暴發(fā)性流行的常見原因[1-3]。由于HuCVs難以培養(yǎng),而ELISA法和免疫熒光法等敏感性和特異性不高[4-6],因此常用

【相似文獻】

中國期刊全文數據庫 前2條

1 方肇寅;謝華萍;呂紅霞;劉娜;章青;段招軍;Duncan Steele;Baoming Jiang;Xi Jiang;;1999~2005年我國嬰幼兒人杯狀病毒腹瀉研究[J];病毒學報;2007年01期

2 謝華萍;方肇寅;章青;歐陽晶;;一種簡單高效擴增人杯狀病毒ORF2區(qū)RT-PCR方法的建立及其意義[J];病毒學報;2006年04期

，

本文編號：979064