本文關(guān)鍵詞：一步法多重?zé)晒舛縍T-PCR檢測(cè)人杯狀病毒的建立及應(yīng)用

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【摘要】：目的建立檢測(cè)人杯狀病毒(human calicivirus,HuCVs,主要包括SV、NoV-GⅠ和NoV-GⅡ)的一步法多重?zé)晒舛縍TPCR(rRT-PCR)法。方法用Primer Express 3.0軟件設(shè)計(jì)特異性引物和探針,通過(guò)合成的對(duì)應(yīng)病毒基因的質(zhì)粒來(lái)評(píng)價(jià)該方法的靈敏度、特異性和重復(fù)性,檢測(cè)臨床標(biāo)本并對(duì)陽(yáng)性結(jié)果進(jìn)行基因測(cè)序驗(yàn)證。結(jié)果建立的rRT-PCR法檢測(cè)SV、NoV-GⅠ和NoV-GⅡ的靈敏度均達(dá)到103copies/mL,特異性為100%,且變異系數(shù)(CV)均≤1.275%。HuCVs檢出率為21.43%(75/350),其中SV、NoV-GⅠ和NoV-GⅡ分別為14.67%(11/75)、21.33%(16/75)和64.00%(48/75)。隨機(jī)選擇檢測(cè)陽(yáng)性結(jié)果進(jìn)行測(cè)序,結(jié)果均與該法檢測(cè)結(jié)果一致。結(jié)論建立的rRT-PCR法可同時(shí)檢測(cè)并區(qū)分SV、NoV-GⅠ和NoV-GⅡ病毒,可用于HuCVs引起的急性腹瀉散發(fā)和暴發(fā)疫情的監(jiān)測(cè)。
【作者單位】： 浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院;浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科;浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科;浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【關(guān)鍵詞】： 人杯狀病毒 札如病毒 諾如病毒 一步法多重?zé)晒舛烤酆厦告湻磻?yīng)
【基金】：浙江省醫(yī)藥衛(wèi)生科技計(jì)劃項(xiàng)目(2012kyb142)
【分類號(hào)】：R373
【正文快照】： 人杯狀病毒(human calicivirus,HuCVs)包括兩個(gè)屬:諾如病毒屬(norovirus,NoV)和札如病毒屬(sapovirus,SV),而SV、NoV-GⅠ和NoV-GⅡ亞型是導(dǎo)致人類發(fā)生急性腹瀉的散發(fā)或暴發(fā)性流行的常見(jiàn)原因[1-3]。由于HuCVs難以培養(yǎng),而ELISA法和免疫熒光法等敏感性和特異性不高[4-6],因此常用

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 方肇寅;謝華萍;呂紅霞;劉娜;章青;段招軍;Duncan Steele;Baoming Jiang;Xi Jiang;;1999~2005年我國(guó)嬰幼兒人杯狀病毒腹瀉研究[J];病毒學(xué)報(bào);2007年01期

2 謝華萍;方肇寅;章青;歐陽(yáng)晶;;一種簡(jiǎn)單高效擴(kuò)增人杯狀病毒ORF2區(qū)RT-PCR方法的建立及其意義[J];病毒學(xué)報(bào);2006年04期

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本文編號(hào)：979064