Let-7d慢病毒載體體外誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞分化為神經(jīng)細胞
發(fā)布時間:2017-10-04 07:25
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【摘要】:背景:微小RNA在生命體生長、衰老的過程中起著重要的作用,了解微小RNA let-7d家族成員對骨髓間充質(zhì)干細胞向神經(jīng)細胞分化的影響可以對干細胞移植起促進作用。目的:探討let-7d慢病毒載體在體外誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞向神經(jīng)細胞分化中的作用。方法:1構(gòu)建大鼠慢病毒載體并感染大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞;實驗分為未轉(zhuǎn)染組、陰性對照組(感染空白慢病毒)、轉(zhuǎn)染上調(diào)組(感染let-7d-LV)、轉(zhuǎn)染下調(diào)組(感染let-7d-inhibition-LV)。2采用法舒地爾誘導(dǎo)轉(zhuǎn)染后大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞分化為神經(jīng)細胞,以免疫細胞化學(xué)染色檢測NSE、MAP-2的表達變化;RT-PCR檢測MAP-2mRNA的表達變化;MTT法檢測細胞存活率。結(jié)果與結(jié)論:倒置熒光顯微鏡下觀察let-7d慢病毒載體轉(zhuǎn)染成功。法舒地爾可以誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞向神經(jīng)細胞分化,其中轉(zhuǎn)染上調(diào)組的誘導(dǎo)效率與陰性對照組相比升高,NSE、MAP-2表達率上升(P0.05);轉(zhuǎn)染下調(diào)組的誘導(dǎo)效率與陰性對照組相比下降,NSE、MAP-2表達率下降(P0.05)。結(jié)果表明let-7d慢病毒載體可以促進骨髓間充質(zhì)干細胞向神經(jīng)細胞的分化,通過控制let-7d的表達可以影響骨髓間充質(zhì)干細胞向神經(jīng)細胞的分化效率。
【作者單位】: 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】: 骨髓 間質(zhì)干細胞 慢病毒屬 神經(jīng)元 干細胞 骨髓干細胞 骨髓間充質(zhì)干細胞 let-d 法舒地爾 誘導(dǎo)分化 慢病毒 國家自然科學(xué)基金
【基金】:國家自然科學(xué)基金項目(骨髓間質(zhì)干細胞神經(jīng)命運決定中的自噬現(xiàn)象及其mTOR信號通路的作用/81071114、Lin28/Let-7調(diào)控的骨髓間充質(zhì)干細胞移植治療阿爾茨海默病的實驗研究/81371385)~~
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 文章亮點:1微小RNA let-7家族在骨髓間充質(zhì)干細胞向神經(jīng)細胞誘導(dǎo)分化的過程中所起的作用,目前尚無相關(guān)報道,為此,實驗探討了let-7家族成員let-7d是否在骨髓間充質(zhì)干細胞向神經(jīng)細胞分化過程中起作用。2通過慢病毒載體的構(gòu)建,并且轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細胞,實現(xiàn)了let-7d在細胞中的增,
本文編號:969359
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