新生小鼠海馬、嗅球及皮質(zhì)神經(jīng)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及鑒定
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【摘要】:背景:從體外分離培養(yǎng)出高純度、生物學(xué)性能均一的神經(jīng)干細(xì)胞,建立起一套完整的神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)體系,是進(jìn)行神經(jīng)干細(xì)胞研究的基礎(chǔ)。目的:建立新生小鼠海馬、嗅球、皮質(zhì)組織神經(jīng)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)體系,并對其生物學(xué)特性進(jìn)行分析。方法:分離新生昆明小鼠海馬、嗅球、皮質(zhì)組織,采用機(jī)械分離和胰酶消化法提取原代神經(jīng)干細(xì)胞。采用無血清培養(yǎng)技術(shù)、機(jī)械吹打和酶消化法進(jìn)行傳代培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞。以體積分?jǐn)?shù)為10%的胎牛血清誘導(dǎo)分化神經(jīng)干細(xì)胞。對神經(jīng)干細(xì)胞及其分化產(chǎn)物行CD133、巢蛋白、β-微管蛋白Ⅲ、膠質(zhì)纖維酸性蛋白免疫熒光染色鑒定。結(jié)果與結(jié)論:從新生小鼠海馬、嗅球、皮質(zhì)可提取出具有自我更新和多向分化能力的神經(jīng)干細(xì)胞,經(jīng)巢蛋白、CD133免疫熒光染色檢測呈陽性;神經(jīng)干細(xì)胞經(jīng)胎牛血清誘導(dǎo)后可分化為β-微管蛋白Ⅲ、膠質(zhì)纖維酸性蛋白陽性細(xì)胞,并證實(shí)染色陽性細(xì)胞為神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞。該實(shí)驗(yàn)建立了一套神經(jīng)干細(xì)胞體外分離培養(yǎng)、純化、鑒定、誘導(dǎo)分化方案,為后續(xù)神經(jīng)干細(xì)胞研究的順利進(jìn)行奠定了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
【作者單位】: 蘭州大學(xué)第二臨床醫(yī)院神經(jīng)外科;蘭州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 神經(jīng)干細(xì)胞 小鼠 海馬 嗅球 干細(xì)胞 培養(yǎng) 神經(jīng)球 皮質(zhì) CD 巢蛋白 神經(jīng)干細(xì)胞庫 甘肅省自然科學(xué)基金
【基金】:甘肅省自然科學(xué)基金(1208RJZA184)~~
【分類號】:R329
【正文快照】: 青海省西寧市人,回族,蘭州大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院在讀碩士,主要從事神經(jīng)干細(xì)胞移植治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的研究。通訊作者:任海軍,教授,碩士生導(dǎo)師,主任醫(yī)師,蘭州大學(xué)第二臨床醫(yī)院神經(jīng)外科,甘肅省蘭州市7300002014.45.010[http://www.crter.org](2014)45-07266-07稿件接受:2014-10-16
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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4 陳寅;鐘z,
本文編號:961227
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