本文關(guān)鍵詞：混合游離脂肪酸對(duì)大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞Toll樣受體4表達(dá)的影響及其介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)機(jī)制

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【摘要】：目的研究混合游離脂肪酸(FFA)對(duì)大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞(RRPMVECs)Toll樣受體4(TLR4)的激活作用及其介導(dǎo)的鏈?zhǔn)窖装Y反應(yīng)機(jī)制。方法以不同濃度的FFA處理體外培養(yǎng)的RPMVECs,Western blotting檢測(cè)TLR4蛋白的表達(dá)。用干擾小RNA(siRNA)轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)的RPMVECs(TLR4 siRNA組和雜序siRNA組),設(shè)立陰性對(duì)照組。分別用0.1 mmol/L FFA、10 ng/mL脂多糖(LPS)和5 ng/mL腫瘤壞死因子-α(TNF-α)處理各組細(xì)胞,以未加藥細(xì)胞作為相應(yīng)的空白組。Real-Time PCR檢測(cè)TLR4 mRNA和NF-κB抑制蛋白激酶β(IKKβ)mRNA的表達(dá),Western blotting檢測(cè)磷酸化核因子κB抑制因子(p-IκBα)和核因子κB(NF-κB)的表達(dá),ELISA法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中炎癥因子白介素-1β(IL-1β)的表達(dá)。結(jié)果 RPMVECs的TLR4蛋白相對(duì)表達(dá)量在0.1 mmol/L FFA處理后顯著增高(P0.05),并隨FFA濃度的升高而增加。在雜序siRNA和陰性對(duì)照組,TLR4 mRNA的相對(duì)表達(dá)量在LPS和FFA處理后顯著升高(P0.05),TNF-α處理無(wú)明顯變化;而在TLR4干擾組,3種處理后TLR4 mRNA的表達(dá)均無(wú)顯著變化。在雜序siRNA和陰性對(duì)照組,3種方式處理后RPMVECs的IKKβmRNA、p-IκBα及IL-1β的相對(duì)表達(dá)量均顯著升高(P0.05),而TLR4 siRNA干擾抑制了其在FFA和LPS處理組的表達(dá),但對(duì)TNF-α組無(wú)抑制作用。結(jié)論 FFA通過(guò)TLR4/IKKβ/NF-κB信號(hào)通路介導(dǎo)RPMVECs的炎癥反應(yīng)。
【作者單位】： 上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院麻醉科;
【關(guān)鍵詞】： 脂肪栓塞 游離脂肪酸 脂多糖 大鼠微血管內(nèi)皮細(xì)胞 Toll樣受體 炎癥反應(yīng)
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81071591)~~
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 脂肪栓塞綜合征(fat embolism syndrome,FES)是脂肪顆粒進(jìn)入血液循環(huán)后引起的病理反應(yīng)癥候群,多見(jiàn)于創(chuàng)傷、手術(shù)和脂肪乳劑輸入等臨床情況[1-3],發(fā)生機(jī)制目前尚不十分清楚。FES發(fā)生時(shí),血漿游離脂肪酸(free fatty acid,FFA)濃度升高[4]。FFA可引起機(jī)體炎癥反應(yīng)[7],但目前尚未見(jiàn)

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本文編號(hào)：956559