尖吻蝮蛇蛇毒多克隆抗體純化及生物活性研究
本文關(guān)鍵詞:尖吻蝮蛇蛇毒多克隆抗體純化及生物活性研究
【摘要】:目的通過(guò)實(shí)驗(yàn)純化出特異性尖吻蝮蛇蛇毒多克隆抗體并檢測(cè)其生物活性。方法以尖吻蝮蛇蛇毒免疫新西蘭兔,利用Econo-Pac Protein A kit及CNBr activated sepharose 4B凝膠對(duì)兔源性抗蛇毒血清抗體進(jìn)行純化,制備特異性尖吻蝮蛇蛇毒多克隆抗體,經(jīng)Western blot和ELISA方法對(duì)抗體進(jìn)行評(píng)價(jià),通過(guò)出血抑制實(shí)驗(yàn)及致死性保護(hù)實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)抗體的生物活性。結(jié)果成功純化出特異性抗尖吻蝮蛇蛇毒多克隆抗體,ELISA檢測(cè)抗體效價(jià)3 200,Western blot證實(shí)多克隆抗體能識(shí)別蛇毒中大多數(shù)毒素蛋白,出血抑制實(shí)驗(yàn)證實(shí)該抗體能有效抑制蛇毒所致的皮下出血,在致死性保護(hù)實(shí)驗(yàn)中,該抗體對(duì)2LD50和4LD50蛇毒分別起到100%和54%的保護(hù)作用。結(jié)論純化獲得的尖吻蝮蛇蛇毒多克隆抗體具有較好特異性和生物活性。
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院急救部;解放軍第98醫(yī)院急診科;
【關(guān)鍵詞】: 尖吻蝮蛇 多克隆抗體 抗體純化
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81071537) 重慶市科技攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目(CSTC2010AC5026) 第三軍醫(yī)大學(xué)臨床創(chuàng)新基金(2009XLC15)~~
【分類號(hào)】:R392
【正文快照】: 尖吻蝮蛇(Deinagkistridon acutus),主要分布在中國(guó)的南方地區(qū),是我國(guó)十大毒性最強(qiáng)毒蛇之一。尖吻蝮蛇蛇毒主要為血液毒,其主要毒素成分多屬絲氨酸蛋白酶、金屬蛋白酶和磷脂酶A2(phospholipase A2)家族,部分蛋白質(zhì)可能屬于去整合素家族[1]。中毒后的主要臨床表現(xiàn)為組織炎癥水
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2 曹t,
本文編號(hào):930542
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