本文關鍵詞：多重PCR-SSP技術應用于HPA-1~17bw基因分型研究和廣西壯族人群HPA多態(tài)性的分布

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【摘要】：目的建立應用于HPA-1~17bw基因分型的多重聚合酶鏈反應-序列特異性引物(PCR-SSP)技術,對廣西壯族人群HPA多態(tài)性分布進行調查。方法設計多種HPA序列特異性引物的組合,在1個PCR反應體系中同時擴增多個HPA基因,根據(jù)擴增片斷的有無和大小,指定相應的HPA基因型,并以17例國際合作研究項目提供的HPA參比DNA配組標本,以及100例已知HPA型的血小板供者的DNA標本作驗證。使用驗證后的技術對2659名無血緣關系的廣西壯族人群展開HPA-1~17bw的基因分型和抗原多態(tài)性研究。結果建立了由16種PCR引物混合液,其中有6種多重PCR引物混合液組成的PCR-SSP反應體系,可用于HPA-1~17bw等位基因的檢測。以HPA參比DNA配組標本,以及已知HPA型的供者的DNA標本的檢測作驗證,HPA分型結果完全一致;在2 659名廣西壯族人群中各HPA等位基因頻率分布為:HPA-1a和-1b為0.991 5和0.008 5,HPA-2a和-2b為0.956 9和0.043 1,HPA-3a和-3b為0.512 2和0.487 8,HPA-5a和-5b為0.985 0和0.015 0,HPA-6a和-6b為0.985 1和0.014 9,HPA-15a和-15b為0.525 6和0.474 4;HPA-4、HPA-7~14bw、HPA-16~17bw只有a/a的純合子;HPA-2~3、HPA-6bw以及HPA-15均存在a/a和b/b純合子基因型個體。結論多重PCR-SSP技術應用于HPA基因分型減少了PCR擴增反應數(shù)量,節(jié)省了人力、物力,HPA分型系統(tǒng)性強,可用于大量標本的HPA-1~17bw基因分型等研究和篩查工作;應用該方法研究證明廣西壯族人群HPA多態(tài)性分布具有民族特征,有助于對壯族人群血小板免疫學特點的了解。
【作者單位】： 南寧輸血醫(yī)學研究所;美國國立衛(wèi)生研究院;
【關鍵詞】： 人類血小板特異性抗原(HPA) HPA基因分型 多重PCR-SSP 壯族 廣西
【基金】：廣西科學研究與技術開發(fā)計劃項目(主席基金)(081 60-05) 南寧市科學研究與技術開發(fā)計劃項目(201003048C-2) 廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生廳自籌經(jīng)費科研課題(Z2010197)
【分類號】：R394
【正文快照】： 自1959年第1個人類血小板特異性抗原(HPA)被鑒定至今,已使用血小板同種抗體(抗-HPA)檢測出35個血小板抗原[1,2]�？�-HPA是造成同種免疫血小板減少癥的直接原因,可以導致新生兒同種免疫血小板減少癥(NAIT)、新生兒同種免疫血小板減少紫癜(NAITP)、輸血后紫癜(PTP)、被動性血小

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