本文關(guān)鍵詞：大容量人源Fab噬菌體展示抗體庫的構(gòu)建及抗CD276抗體篩選

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【摘要】：目的構(gòu)建大容量人源Fab噬菌體庫,篩選并鑒定抗CD276的特異性抗體。方法通過采集10位健康成人的外周血淋巴細(xì)胞,提取總RNA,利用RT-PCR擴增人Fab抗體基因片段,插入噬菌體載體pCANTAB5H中,構(gòu)建人源Fab噬菌體抗體庫。通過固相化的抗原對抗體庫進(jìn)行3輪篩選后,隨機挑取96個單克隆進(jìn)行phage-ELISA鑒定,篩選出與抗原具有較強結(jié)合性的噬菌體克隆。結(jié)果成功構(gòu)建庫容為5×1010的噬菌體抗體庫,從中篩選到11株陽性克隆,對其進(jìn)行測序鑒定,表明該11株克隆的序列均一致,ELISA證實其對抗原CD276具有較強的結(jié)合性。結(jié)論構(gòu)建了大容量人源Fab抗體庫,從中獲得具有抗CD276的人源Fab抗體片段,為進(jìn)一步的研究和應(yīng)用提供實驗基礎(chǔ)。
【作者單位】： 中國科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院抗體藥物研究中心;吉林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 免疫球蛋白Fab片段 噬菌體展示抗體庫 CD
【基金】：諾和諾德-中科院專項研究經(jīng)費(NNCAS-2013-9)
【分類號】：R392
【正文快照】： CD276,又叫B7-H3,是2001年在人樹突狀細(xì)胞cDNA文庫中鑒定出的B7超家族共信號分子[1]。近年來的研究表明共信號分子不僅能提供T細(xì)胞活化所需的共信號分子促進(jìn)T細(xì)胞免疫應(yīng)答[2],在抗炎和抗腫瘤免疫應(yīng)答中發(fā)揮關(guān)鍵作用,同時也可以提供下調(diào)免疫應(yīng)答的負(fù)性共信號分子,維持T細(xì)胞免疫

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王琰;抗體庫技術(shù)[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;1993年03期

2 杜威世;孫志偉;俞煒源;;噬菌體抗體庫研究進(jìn)展[J];生物技術(shù)通訊;2006年02期

3 張春莉;抗體庫技術(shù)[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展;2001年04期

4 勾藍(lán)圖;楊金亮;;抗體庫技術(shù)與策略進(jìn)展[J];生物技術(shù)通訊;2009年06期

5 高學(xué)良,錢e，

本文編號：918205