本文關(guān)鍵詞：人骨髓來源間充質(zhì)干細(xì)胞分泌外泌體特性研究

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【摘要】：本研究旨在探討正常人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSC)分泌的外泌體(exosome)免疫調(diào)節(jié)功能及支持血管形成能力。收集第4-6代BMMSC上清液提取外泌體,應(yīng)用透射電鏡觀察其形態(tài),蛋白印跡法檢測其表面特異標(biāo)志CD9,bicinchoninic acid(BCA)方法定量檢測外泌體分泌量;與正常人外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMNC)作用72 h后用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測PBMNC分泌的γ-干擾素(IFN-γ);實(shí)時(shí)定量PCR檢測外泌體內(nèi)免疫相關(guān)microRNA表達(dá);共聚焦顯微鏡觀察外泌體與人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的作用方式,與HUVEC共培養(yǎng)后觀察其網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)形成;應(yīng)用裸鼠體內(nèi)試驗(yàn)檢測外泌體對血管形成能力的作用。結(jié)果表明,正常人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分泌的外泌體近似圓形,直徑在40-160 nm之間,表達(dá)表面標(biāo)志CD9,其分泌量與接種細(xì)胞數(shù)呈線性關(guān)系,可抑制PBMNC分泌IFN-γ(P0.01),內(nèi)含有免疫相關(guān)microRNA如miR301、miR22和miR-let-7a等,能促進(jìn)HUVEC網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)形成和血管形成(P0.01)。結(jié)論:BMMSC分泌外泌體具有免疫調(diào)節(jié)功能與支持血管形成作用。
【作者單位】： 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院、北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院血液病醫(yī)院、血液學(xué)研究所 實(shí)驗(yàn)血液學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 外泌體 免疫調(diào)節(jié) 血管形成
【基金】：國家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目(81330015) 國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃"973計(jì)劃"(2011CB964800)
【分類號】：R329.25
【正文快照】： 外泌體(exosome)為微小囊泡,直徑大約20-140 nm,在生理或病理情況下,由多種細(xì)胞內(nèi)膜(en-dosomal membrane)以出芽方式形成的多泡體,參與細(xì)胞間的信息交流,并參與到多種生理病理過程中[1]。來源于不同的組織的外泌體不僅具有其特異性蛋白分子,而且還包含其行使功能的關(guān)鍵分子[2

【相似文獻(xiàn)】

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中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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2 楊牧;草魚轉(zhuǎn)化生長因子β1的免疫調(diào)節(jié)功能及其作用機(jī)制[D];電子科技大學(xué);2012年

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4 李Z腦，

本文編號：900698