發(fā)布時(shí)間：2017-09-20 09:31

  本文關(guān)鍵詞：大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外分離培養(yǎng)與鑒定

  更多相關(guān)文章： 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 全骨髓貼壁法 鑒定

【摘要】：目的建立大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)體外分離培養(yǎng)方法。方法采用全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)BMSCs,進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察,繪制生長曲線,流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞周期、檢測(cè)細(xì)胞表面抗原標(biāo)志物,并進(jìn)行成脂、成骨分化誘導(dǎo)。結(jié)果獲取的BMSCs形態(tài)呈均一成纖維細(xì)胞樣,并呈集落樣生長。生長曲線呈S形,細(xì)胞周期顯示86.02%P3代細(xì)胞為G0/G1期,保持活躍的擴(kuò)增能力。BMSCs高表達(dá)CD44、CD90、低表達(dá)CD34、CD45。成脂誘導(dǎo)21 d后,可見細(xì)胞的胞漿內(nèi)出現(xiàn)大量紅染脂滴。成骨誘導(dǎo)21 d后,可見大量橘紅色礦化結(jié)節(jié)形成。結(jié)論全骨髓貼壁培養(yǎng)法可成功有效地分離培養(yǎng)BMSCs。
【作者單位】： 浙江中醫(yī)藥大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院;解放軍第一一七醫(yī)院消化內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 全骨髓貼壁法 鑒定
【基金】：浙江省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2011C13029-1)
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： BMSCs具有高度增殖的能力、體外基因轉(zhuǎn)移效率高以及多向分化潛能等優(yōu)點(diǎn)[1-2],使其成為組織工程、細(xì)胞替代治療等領(lǐng)域的首選種子細(xì)胞。但是骨髓中的間充質(zhì)干細(xì)胞含量極低[3],且其含量隨年齡增長而逐漸減少[4],需經(jīng)體外分離、純化、擴(kuò)增為純度高、活力強(qiáng)、生物特性均一的間充質(zhì)

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 楊麗;張榮華;謝厚杰;蔡宇;黃豐;;建立大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞穩(wěn)定分離培養(yǎng)體系與鑒定[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2009年06期

2 林楚偉;周勝華;杜優(yōu)優(yōu);;全骨髓貼壁并差速傳代分離純化大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞:與密度梯度離心法的比較[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2010年14期

3 張君紅;姜海行;覃山羽;孟云超;寧琳;;全骨髓細(xì)胞貼壁法分離與培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的多向分化能力[J];中國組織工程研究;2012年36期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陽玉群;莫雪安;農(nóng)偉東;楊龍秀;孔德燕;張?zhí)i;劉金萍;;全骨髓貼壁改良培養(yǎng)法體外分離培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞[J];廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2013年02期

2 Brian E. Grottkau;Xingmei Yang;Liang Zhang;Ling Ye;Yunfeng Lin;;Comparison of Effects of Mechanical Stretching on Osteogenic Potential of ASCs and BMSCs[J];Bone Research;2013年03期

3 徐麗萍;龍大宏;校對(duì);;誘導(dǎo)多能干細(xì)胞及其在神經(jīng)再生醫(yī)學(xué)的應(yīng)用前景[J];解剖學(xué)研究;2013年05期

4 王寒;趙根尚;周玉陽;高峰;張正升;何攀;李明;;SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離提純及鑒定[J];中華實(shí)用診斷與治療雜志;2012年05期

5 何丁文;殷嫦嫦;殷明;;全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞研究[J];九江學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2012年04期

6 朱延輝;王國賢;;芒果苷對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞缺氧損傷的保護(hù)作用[J];解剖科學(xué)進(jìn)展;2013年02期

7 王亞莉;陳國軍;方鳳;崔玉華;劉厚奇;;疫苗接種后急性播散性腦脊髓炎后遺下肢癱瘓[J];臨床誤診誤治;2013年10期

8 楊超;戴為民;陳海旭;吳本儼;;骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞在放射性胃腸綜合征治療中的應(yīng)用前景[J];中國科學(xué):生命科學(xué);2013年11期

9 謝弘;徐月敏;傅強(qiáng);;尿液TGF-β_1對(duì)人尿道狹窄瘢痕成纖維細(xì)胞CXCR3表達(dá)的影響研究[J];臨床泌尿外科雜志;2013年09期

10 何丁文;鄔亞華;殷明;魏強(qiáng)強(qiáng);殷嫦嫦;;不同胎牛血清、培養(yǎng)瓶體外培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞效果比較[J];山東醫(yī)藥;2012年38期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李曉峰;芒果苷對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞缺氧損傷的保護(hù)機(jī)制研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

2 王洪艷;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)胸腺輻射凋亡的作用及其成瘤過程中機(jī)制的探討[D];吉林大學(xué);2011年

3 趙科研;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)大鼠模型肺動(dòng)脈高壓的治療作用及對(duì)ET-1表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2011年

4 權(quán)學(xué)民;益氣化瘀中藥結(jié)合BMSCs移植干預(yù)腰椎間盤退變的實(shí)驗(yàn)研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2011年

5 黃怡;大鼠牙髓干細(xì)胞在微弧氧化鈦表面誘導(dǎo)分化成骨的研究[D];華中科技大學(xué);2012年

6 房林;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植促進(jìn)皮膚創(chuàng)傷愈合的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2010年

7 郝彥琴;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)急性肝衰竭大鼠腸源性內(nèi)毒素血癥的治療作用及機(jī)制研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2010年

8 劉劍;受體來源大鼠ADSCs分化的類肝細(xì)胞誘導(dǎo)大鼠肝移植免疫耐受的實(shí)驗(yàn)研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2011年

9 李亞楠;陰道上皮細(xì)胞體外誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向上皮細(xì)胞分化的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

10 嚴(yán)敏;Lmx1α和NTN定向誘導(dǎo)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞為DA能神經(jīng)元及靶向性治療恒河猴PD模型的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 黃家志;兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)及誘導(dǎo)多向分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

2 徐靜;Wistar大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定[D];吉林大學(xué);2011年

3 李朝中;不同途徑移植骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞至心肌梗死大鼠的實(shí)驗(yàn)研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2011年

4 譚亮;SD大鼠脊髓損傷后早期注射BMSCs對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2011年

5 何鳳璞;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為血管平滑肌樣細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2011年

6 翟旭;大鼠牙髓干細(xì)胞與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化成骨樣細(xì)胞能力對(duì)比研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

7 許寶滿;五種中藥對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外增殖活性影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2011年

8 尹來波;大塊異種脫細(xì)胞骨基質(zhì)的制備及組織相容性研究[D];石河子大學(xué);2011年

9 王珊珊;不同濃度的bFGF和EGF對(duì)體外培養(yǎng)的視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞增殖的影響[D];福建醫(yī)科大學(xué);2010年

10 李祥炎;Ang-1基因修飾的Nestin陽性骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療脊髓損傷的實(shí)驗(yàn)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2010年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 杜俊杰,羅卓荊,胡蘊(yùn)玉,李志創(chuàng),呂榮;rhBMP-2在體內(nèi)誘導(dǎo)成骨中I,II型膠原及堿性磷酸酶的表達(dá)[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2001年11期

2 姜文敏,唐羅生;視神經(jīng)再生的相關(guān)因素研究[J];國際眼科雜志;2005年03期

3 邵毅;裴重剛;;干細(xì)胞治療視網(wǎng)膜疾病的研究進(jìn)展[J];國際眼科雜志;2006年02期

4 覃山羽;于冰;姜海行;羅顯克;梁昌宇;陳維平;;大鼠骨髓源性肝干細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征的實(shí)驗(yàn)研究[J];廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2009年01期

5 黃定強(qiáng);楊大鑒;黎萬榮;胥方元;歐小毅;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向誘導(dǎo)條件下向脂肪細(xì)胞和成骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化的關(guān)系[J];中國臨床康復(fù);2006年01期

6 楊玉霞;鄭健j;張平;林健賢;張文忻;;密度梯度離心結(jié)合貼壁法培養(yǎng)成年大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性(英文)[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2007年03期

7 楊芬;楊乃龍;;兩種體外分離成人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞方法的比較[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2008年03期

8 賈秀娟;孫曉娟;徐麗麗;;特定微環(huán)境條件下人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化為脂肪細(xì)胞[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2008年34期

9 楊麗;張榮華;謝厚杰;蔡宇;黃豐;;建立大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞穩(wěn)定分離培養(yǎng)體系與鑒定[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2009年06期

10 劉霞;任廣達(dá);單偉;曾瑞霞;李德華;秦書儉;;鋅對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞DNA和蛋白質(zhì)含量及增殖周期的影響[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2009年10期

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 于麗;劉霞;柯小亮;劉金鐘;孫宏晨;;TWEAK誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖作用的初步實(shí)驗(yàn)研究[J];哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2009年02期

2 徐蘊(yùn);肖瓊;田鏵;張立平;田廣平;;細(xì)胞外基質(zhì)對(duì)大鼠MSCs生物學(xué)活性的影響[J];中國現(xiàn)代普通外科進(jìn)展;2007年01期

3 李延清;劉霞;;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離與培養(yǎng)[J];西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2006年05期

4 王超;徐蘊(yùn);宋文剛;常維山;;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)方法的建立及其表型分析[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2007年05期

5 徐世平;毛學(xué)英;任發(fā)政;;大鼠前脂肪細(xì)胞的培養(yǎng)及酪蛋白糖巨肽對(duì)其增殖的影響[J];食品科學(xué);2009年13期

6 張燕,劉杰,王德文,崔雪梅,谷慶陽,董波,趙梅蘭;胎兒骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及表面標(biāo)志的檢測(cè)[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2002年06期

7 周竹娟;鄭健;;低血清培養(yǎng)對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞細(xì)胞周期同步化的影響[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2007年04期

8 劉淑敏;朱瑞良;蔡秀玲;;轉(zhuǎn)錄因子靶基因的鑒定[J];植物生理學(xué)通訊;2007年02期

9 曾顯成;;鴨疫里默氏菌的分離鑒定[J];福建畜牧獸醫(yī);2007年05期

10 呂昌偉;胡蘊(yùn)玉;白建萍;呂榮;;轉(zhuǎn)壁反應(yīng)器三維立體培養(yǎng)多樣本骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究[J];中國骨與關(guān)節(jié)損傷雜志;2008年07期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉清津;葉俊華;楊松濤;夏咸柱;諶南輝;;犬細(xì)小病毒NJ-04株的分離與初步鑒定[A];第十三次全國養(yǎng)犬學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2009年

2 段莎麗;孫亞琴;伍陽;龍用波;謝晴;鄧仕槐;;兩株耐堿性亞硝化細(xì)菌的初步鑒定和特性研究[A];第二屆全國農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2007年

3 馬艷;和春英;羅瓊;趙雁;曾千春;張?zhí)?張中義;;中國炭疽菌屬(Colletotrichum)的分類研究Ⅳ[A];中國植病、菌物學(xué)會(huì)杭州聯(lián)合年會(huì)論文集[C];2008年

4 游銀偉;尤升波;岳壽松;;產(chǎn)角蛋白酶芽孢菌YYW-1的鑒定及產(chǎn)酶性質(zhì)分析[A];中華預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)微生態(tài)學(xué)第二屆特種醫(yī)學(xué)暨河南省、山東省預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)微生態(tài)學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2006年

5 孫婧;翟廣書;李璐;何濱;駱文茹;江桂斌;;砂海螂體內(nèi)錫結(jié)合蛋白及其高富集有機(jī)錫機(jī)理的研究[A];第五屆全國環(huán)境化學(xué)大會(huì)摘要集[C];2009年

6 荊宇;趙雁;張榮;張?zhí)?蘭建強(qiáng);何永宏;張中義;;中國炭疽菌屬(Colletotrichum)的分類研究Ⅴ[A];中國植病、菌物學(xué)會(huì)杭州聯(lián)合年會(huì)論文集[C];2008年

7 焦金波;黃娟;秦曉冰;陳麗;溫海燕;單虎;;犬瘟熱病毒F蛋白單克隆抗體的制備及鑒定[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)畜牧獸醫(yī)生物技術(shù)學(xué)分會(huì)暨中國免疫學(xué)會(huì)獸醫(yī)免疫分會(huì)第七次研討會(huì)論文集[C];2008年

8 都啟晶;龐倩;文心田;黃小波;曹三杰;;副豬嗜血桿菌SC-1株的分離培養(yǎng)及鑒定[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)2009學(xué)術(shù)年會(huì)論文集（下冊(cè)）[C];2009年

9 楊起簡;;植物超弱發(fā)光及在抗逆性方面的應(yīng)用[A];第六屆全國光生物學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2004年

10 李任峰;戴金康;王絹;王三虎;鄭玉姝;劉麗艷;;新鄉(xiāng)地區(qū)兔巴氏桿菌的分離與鑒定[A];第四屆第九次全國學(xué)術(shù)研討會(huì)暨飼料和動(dòng)物源食品安全戰(zhàn)略論壇論文集（下冊(cè)）[C];2008年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 陳丹;腫瘤與動(dòng)物機(jī)體生長曲線相似[N];科技日?qǐng)?bào);2003年

2 記者 盧蘇燕;克隆兔來了[N];新華每日電訊;2002年

3 記者盧蘇燕;克隆兔落地法國[N];人民日?qǐng)?bào);2002年

4 《技術(shù)預(yù)測(cè)與國家關(guān)鍵技術(shù)選擇》研究組生命科學(xué)與生物技術(shù)領(lǐng)域組;生命科學(xué)發(fā)展趨勢(shì)[N];中國社會(huì)科學(xué)院院報(bào);2003年

5 記者 盧蘇燕;中法攜手把克隆技術(shù)推向?qū)嵱没痆N];新華每日電訊;2000年

6 蘇燕;克隆優(yōu)秀種畜不再是幻想[N];農(nóng)民日?qǐng)?bào);2000年

7 李文;中美學(xué)者探索胰腺分泌調(diào)節(jié)分子機(jī)制[N];中國醫(yī)藥報(bào);2009年

8 孫國根　記者 王春;我科學(xué)家發(fā)現(xiàn)GRK在胚胎發(fā)育中的新功能[N];科技日?qǐng)?bào);2009年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王光輝;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞三維定向誘導(dǎo)和體內(nèi)構(gòu)建組織工程軟骨的初步實(shí)驗(yàn)研究[D];四川大學(xué);2005年

2 宋可新;黑色素細(xì)胞與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞復(fù)合構(gòu)建組織工程皮膚的初步研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

3 趙子義;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞構(gòu)建組織工程化骨與軟骨的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2005年

4 張莉萍;皮膚組織工程中骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞作為種子細(xì)胞的可行性研究[D];浙江大學(xué);2009年

5 鄭心田;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向血管內(nèi)皮細(xì)胞誘導(dǎo)分化的實(shí)驗(yàn)研究及差異表達(dá)基因的微陣列分析[D];天津醫(yī)科大學(xué);2006年

6 梁峰;組織工程肝單元構(gòu)建的研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2006年

7 王楠;磷脂酰膽堿特異性磷脂酶C調(diào)節(jié)成體干細(xì)胞分化和凋亡的研究[D];山東大學(xué);2007年

8 王樝;旋轉(zhuǎn)生物反應(yīng)器內(nèi)微載體擴(kuò)增骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞骨組織工程的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2007年

9 王濤;納米雙相磷酸鈣瓷用于組織工程支架材料的實(shí)驗(yàn)研究[D];四川大學(xué);2005年

10 趙一麟;自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞復(fù)合脫細(xì)胞血管支架構(gòu)建組織工程血管的研究[D];吉林大學(xué);2006年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 董玉泉;兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)、鑒定及生物學(xué)特性研究[D];青島大學(xué);2006年

2 王挺;兔異體血清及組織提取物對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖和分化作用的研究[D];浙江大學(xué);2006年

3 郭軍;細(xì)胞因子預(yù)處理對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖分化的影響[D];武漢大學(xué);2005年

4 周婭蕾;低強(qiáng)度脈沖電磁場(chǎng)對(duì)體外培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的影響[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2007年

5 胡小容;幾株紫色非硫細(xì)菌的分離鑒定與產(chǎn)氫特性分析[D];重慶大學(xué);2008年

6 姚祥春;氣單胞菌產(chǎn)幾丁質(zhì)酶的工藝條件優(yōu)化和應(yīng)用初探[D];浙江工業(yè)大學(xué);2008年

7 姜河;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與脫細(xì)胞角膜基質(zhì)構(gòu)建組織工程角膜研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2008年

8 汪蕾;“心肌樣”環(huán)境誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化的研究[D];武漢大學(xué);2005年

9 李玲巧;細(xì)胞培養(yǎng)芯片的研制及芯片內(nèi)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化控制的前期研究[D];廈門大學(xué);2009年

10 胡亮;小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外定向誘導(dǎo)分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2006年

，

本文編號(hào)：887264