本文關(guān)鍵詞：心肌組織特異性高表達(dá)核仁素轉(zhuǎn)基因小鼠的構(gòu)建與鑒定

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【摘要】：目的:構(gòu)建并鑒定心肌組織特異性高表達(dá)核仁素(Ncl)的轉(zhuǎn)基因小鼠,為從整體水平上研究核仁素對(duì)心肌功能的影響及其發(fā)揮心肌保護(hù)作用的機(jī)制提供動(dòng)物模型。方法:采用基因重組法將小鼠核仁素基因的全長(zhǎng)cDNA插入含心肌細(xì)胞特異性啟動(dòng)子的Alpha-MyHC clone 26載體,構(gòu)建Alpha-MyHC clone 26-Ncl重組載體,通過(guò)雙酶切及基因測(cè)序鑒定其正確性;采用PCR鑒定陽(yáng)性小鼠并用Western blotting法觀察轉(zhuǎn)基因小鼠中核仁素的表達(dá)情況,采用組織切片及HE染色法觀察轉(zhuǎn)基因小鼠心肌組織形態(tài);測(cè)量心臟重量指數(shù)和左室壓最大上升速率,觀察核仁素在心肌組織高表達(dá)后對(duì)小鼠心臟形態(tài)功能是否有影響。結(jié)果:PCR法觀察顯示獲得4只陽(yáng)性小鼠(51、52、56和86,其中52和86系繁殖良好),Western blotting結(jié)果表明轉(zhuǎn)基因小鼠的核仁素表達(dá)量明顯高于野生鼠,HE染色等結(jié)果表明核仁素對(duì)心肌形態(tài)學(xué)、心臟/體重比值及心功能無(wú)明顯影響。結(jié)論:成功制備了心肌組織特異性高表達(dá)核仁素的轉(zhuǎn)基因小鼠,與野生型小鼠相比,轉(zhuǎn)基因小鼠心肌形態(tài)及心功能無(wú)明顯差異。
【作者單位】： 中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院病理生理教研室;
【關(guān)鍵詞】： 核仁素 轉(zhuǎn)基因 心肌 小鼠
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81170113)
【分類(lèi)號(hào)】：R363
【正文快照】： 核仁素(nucleolin,Ncl)是目前發(fā)現(xiàn)的271種核仁蛋白質(zhì)中含量最多的一種,約占核仁蛋白質(zhì)總量 的10%⑴,是細(xì)胞內(nèi)一個(gè)非常重要的具有多功能的務(wù)有限公司設(shè)計(jì)并合成核仁素PCR擴(kuò)增引物,上游穿梭蛋白。研究表明,核仁素具有多種生物學(xué)功能,引物5’-AGTGAGGAAGATGCCAAAGC-3’,下游引物

【相似文獻(xiàn)】

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3 蔣碧梅;;核仁素對(duì)大鼠心肌缺血預(yù)適應(yīng)中HSP70表達(dá)的影響及其機(jī)制[A];中國(guó)病理生理學(xué)會(huì)第九屆全國(guó)代表大會(huì)及學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2010年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

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本文編號(hào)：847584