發(fā)布時間：2017-09-12 15:44

  本文關(guān)鍵詞：一種高純度和高活力的大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的提取及原代培養(yǎng)方法

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【摘要】：目的建立一種純度和活力較高、簡單實用的大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離及原代培養(yǎng)方法,為建立體外血腦屏障提供材料。方法采集1-2周SD大鼠大腦皮質(zhì),應(yīng)用Ⅱ型膠原酶和分散酶/膠原酶連續(xù)消化法,篩網(wǎng)過濾法及20%BSA和44%Percoll兩次梯度離心法獲得腦微血管段后,接種于培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng),采用倒置顯微鏡對所培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察,以Ⅷ因子相關(guān)抗原免疫染色法對其進(jìn)行鑒定。結(jié)果體外培養(yǎng)2 h后,微血管內(nèi)皮細(xì)胞爬出血管段進(jìn)行貼壁生長,3~4 d呈典型的鋪路卵石樣結(jié)構(gòu),Ⅷ因子相關(guān)抗原免疫組化檢測內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)呈陽性,可見細(xì)胞胞質(zhì)呈棕色,陽性細(xì)胞占99%以上。結(jié)論該方法能成功地分離并培養(yǎng)出高純度的大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞,對體外血腦屏障的建立以及腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的生物學(xué)特性和功能的深入研究具有重要意義。
【作者單位】： 貴陽醫(yī)學(xué)院民族藥與中藥開發(fā)應(yīng)用教育部工程研究中心;貴州省藥物制劑重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 大鼠 腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 原代培養(yǎng) 血腦屏障 形態(tài)學(xué) 免疫染色
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(No 81260473) 貴州省中藥現(xiàn)代化科技產(chǎn)業(yè)研究開發(fā)專項項目(No黔科合中藥字2012-3013號) 貴州省優(yōu)秀青年科技人才培養(yǎng)對象專項基金(No 2013-45號) 貴州省中藥現(xiàn)代化科技產(chǎn)業(yè)研究開發(fā)專項(No黔科合重G字[2013]4001)
【分類號】：R363
【正文快照】： 血腦屏障(blood-brain barrier,BBB)是存在于血液與腦組織間的一道生理屏障,對于維持中樞神經(jīng)系統(tǒng)的穩(wěn)定起著重要作用。它的存在使處于循環(huán)中的內(nèi)源性和外源性物質(zhì)無法輕易透過其進(jìn)入大腦組織,從而保護(hù)大腦不被血液內(nèi)的微生物和毒素傷害[1],但同時也導(dǎo)致絕大多數(shù)藥物無法進(jìn)入

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 劉愷鳴;遲路湘;魯向輝;何國祥;;大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的原代培養(yǎng)[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2007年20期

2 田林郁;李勝富;周東;;大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及不同純化方法的比較[J];四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2010年05期

3 鹿文葆;秦偉偉;劉淑英;李宏偉;修瑞娟;;大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的純化培養(yǎng)與鑒定[J];中國腦血管病雜志;2011年10期

4 王義寶;劉云會;劉麗波;王萍;馬永會;;大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的原代培養(yǎng)及其生物學(xué)行為初步探討[J];神經(jīng)解剖學(xué)雜志;2006年02期

5 李正偉;卞紅強(qiáng);羅正利;王勝;王煜;陳勁草;;大鼠腦皮質(zhì)微血管內(nèi)皮細(xì)胞的原代培養(yǎng)和鑒定[J];華中科技大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2012年05期

6 趙琳;郭虹;康立源;胡利民;;腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的研究進(jìn)展[J];中國藥理學(xué)通報;2008年08期

7 吳秀芹;梅曉云;吳顥昕;李洋;李輝;;大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的原代培養(yǎng)與鑒定[J];中國實驗方劑學(xué)雜志;2011年03期

8 王艷;汪寧;林辰雨;;腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的原代培養(yǎng)方法概述[J];中國藥理學(xué)通報;2013年02期

9 陳劍鴻;劉松青;王章陽;陳勇川;孫鳳軍;趙映蘭;;藥物實驗血腦屏障體外模型的建立及評價[J];中國醫(yī)院藥學(xué)雜志;2008年07期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉愷鳴;遲路湘;魯向輝;;缺氧條件下大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞對共培養(yǎng)的人間充質(zhì)干細(xì)胞分化的影響[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2008年07期

2 李s，

本文編號：838106