雙重實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)副溶血性弧菌和創(chuàng)傷弧菌方法的建立
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更多相關(guān)文章: 副溶血性弧菌 創(chuàng)傷弧菌 實(shí)時(shí)熒光PCR
【摘要】:目的建立雙重實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)副溶血性弧菌和創(chuàng)傷弧菌的方法。方法在Gen Bank數(shù)據(jù)庫(kù)查找序列并比對(duì)后設(shè)計(jì)tdh和vvh A基因引物和探針。對(duì)PCR反應(yīng)退火溫度、引物、探針、Mg2+、Taq DNA聚合酶及d NTPs濃度進(jìn)行優(yōu)化,確定反應(yīng)體系和反應(yīng)條件,并對(duì)新建方法的特異性、靈敏度等方面進(jìn)行分析,對(duì)模擬樣品進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果建立了雙重實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)副溶血性弧菌和創(chuàng)傷弧菌的方法。該方法的特異性較好,檢測(cè)限為103 CFU/ml。結(jié)論建立的雙重?zé)晒釶CR方法可快速、靈敏、特異地檢測(cè)副溶血性弧菌和創(chuàng)傷弧菌。
【作者單位】: 深圳市龍崗區(qū)疾病預(yù)防控制中心;
【關(guān)鍵詞】: 副溶血性弧菌 創(chuàng)傷弧菌 實(shí)時(shí)熒光PCR
【基金】:深圳市科技計(jì)劃項(xiàng)目(201203348)
【分類(lèi)號(hào)】:R440;R378.3
【正文快照】: 近年來(lái),致病性弧菌如霍亂弧菌(Vibriocholera)、副溶血性弧菌(V.parahaemolyticus)、創(chuàng)傷弧菌(V.vulnificus)及溶藻弧菌(V.alginolyticus)等已成為散發(fā)、流行性腹瀉和食物中毒的重要病原菌[1]。特別是在我國(guó)沿海地區(qū),副溶血性弧菌為最主要食物中毒病原菌,是重要的食源性致病菌
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