本文關鍵詞：福氏志賀菌5a型M90T株GAPDH蛋白多克隆抗體的制備和鑒定

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【摘要】：目的制備高效的福氏志賀菌5a M90T3-磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)的多克隆抗體,并對其特異性進行評價。方法提取M90T的全基因組,采用PCR法擴增M90T中的基因gapA克隆到原核表達載體pET-24中,重組質粒轉入到大腸桿菌BL21(DE3)中進行誘導表達,條件優(yōu)化后純化GAPDH-His融合蛋白。以純化的融合蛋白作為抗原免疫BALB/c小鼠,制備該蛋白的多克隆抗體。Western blot法、ELISA鑒定獲得的抗血清。結果成功構建了原核表達載體pET24a-gapA,通過一系列誘導條件的優(yōu)化,確定可溶性條件為30℃、1 mmol/L IPTG誘導2 h。用純化的融合蛋白GAPDH-His作為抗原免疫小鼠制備多克隆抗體,Western blot法、ELISA證明多克隆抗體制備成功。結論成功制備了福氏志賀菌5a M90T特異性的小鼠多克隆抗體。
【作者單位】： 內蒙古農業(yè)大學獸醫(yī)學院;軍事醫(yī)學科學院生物工程研究所;
【關鍵詞】： 福氏志賀菌aMT -磷酸甘油醛脫氫酶 多克隆抗體
【基金】：國家自然科學基金(30970122)
【分類號】：R392-33
【正文快照】： 志賀氏菌,俗稱痢疾桿菌,定植在人的小腸上皮細胞內引起人類腹瀉。報道稱,每年全球約有1.6億人感染,多數發(fā)生在衛(wèi)生條件差的發(fā)展中國家[1-2]。在福氏志賀菌(Shigella flexneri)5a M90T中,3-磷酸甘油醛脫氫酶(glyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenase,GAPDH)是糖酵解的重要酶之

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前2條

1 龔益熊;廖翔;朱力;吳蘭;周曉巍;梁龍;黃培堂;;雙向BN/SDS-PAGE分離鑒定痢疾桿菌福氏5型M90T株毒力相關膜蛋白復合物[J];生物技術通報;2011年09期

2 王羽;周圍;廖翔;魏波;冉金寶;高原;呼和巴特爾;岳俊杰;梁龍;;弗氏志賀菌5a型M90T株ClpB蛋白在大腸桿菌中的融合表達和純化[J];生物技術通訊;2012年06期

【共引文獻】

中國期刊全文數據庫 前3條

1 冉金寶;廖翔;周圍;王羽;魏波;高原;岳俊杰;梁龍;王純潔;;弗氏志賀菌M90T株毒力相關膜蛋白復合物組成基因缺失突變體的構建[J];生物技術通訊;2012年06期

2 王羽;周圍;廖翔;魏波;冉金寶;高原;呼和巴特爾;岳俊杰;梁龍;;弗氏志賀菌5a型M90T株ClpB蛋白在大腸桿菌中的融合表達和純化[J];生物技術通訊;2012年06期

3 王羽;周圍;廖翔;高原;戴紅梅;岳俊杰;梁龍;呼和巴特爾;;志賀菌福氏5a M90T毒力蛋白Apyrase的表達、純化及多克隆抗體制備[J];中國免疫學雜志;2013年10期

中國碩士學位論文全文數據庫 前1條

1 冉金寶;福氏志賀氏菌M90T毒力相關膜蛋白復合物組成蛋白基因缺失突變體的構建[D];內蒙古農業(yè)大學;2012年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前1條

1 龔益熊;廖翔;朱力;吳蘭;周曉巍;梁龍;黃培堂;;雙向BN/SDS-PAGE分離鑒定痢疾桿菌福氏5型M90T株毒力相關膜蛋白復合物[J];生物技術通報;2011年09期

【相似文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 蘇潔;王斌;魯曉晴;趙巍;閆志勇;錢冬萌;丁守怡;宋旭霞;楊麗;劉海燕;;D2蛋白酶間接ELISA檢測方法的建立[J];中國生物制品學雜志;2010年02期

2 李淑娟;牛育鴻;;金磁微粒介導的抗六聚組氨酸多克隆抗體的純化[J];陜西科技大學學報(自然科學版);2010年05期

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4 謝忠平,崔萍芳,宋霞,李華,龍潤鄉(xiāng),洪超,熊秋霞,李文忠,李琦涵;利用HCV多表位復合抗原制備高效價抗體[J];中國生物制品學雜志;2005年04期

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6 王弘s，

本文編號：827161