本文關(guān)鍵詞：鏈球菌溶血素O抗原的原核表達及條件優(yōu)化

  更多相關(guān)文章： 鏈球菌溶血素O抗原 包涵體 自誘導(dǎo) 蛋白純化

【摘要】：目的構(gòu)建鏈球菌溶血素O抗原(SLO)的重組表達質(zhì)粒,并優(yōu)化其在大腸桿菌中的最佳表達條件。方法以A群鏈球菌DNA為模板,采用PCR法擴增SLO基因,將擴增的基因連接pET-32a(+)表達載體構(gòu)建pET-32a(+)-SLO重組質(zhì)粒,重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌BL21(DE3)中,轉(zhuǎn)化后的表達菌經(jīng)異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)誘導(dǎo)和自誘導(dǎo)的方式分別誘導(dǎo)及純化,最終確定最佳的表達條件。結(jié)果 PCR擴增的基因大小與SLO基因大小一致,測序完全正確。不同濃度的IPTG誘導(dǎo)均為包涵體表達,且表達量均較低;自誘導(dǎo)的方式,不僅表達量明顯提高,且實現(xiàn)了部分可溶性表達。結(jié)論成功構(gòu)建了SLO的原核表達質(zhì)粒,優(yōu)化篩選出能高效可溶性表達的誘導(dǎo)條件,純化獲得了SLO重組融合蛋白質(zhì),為進一步的基礎(chǔ)及臨床研究應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 南京軍區(qū)鼓浪嶼療養(yǎng)院檢驗科;
【關(guān)鍵詞】： 鏈球菌溶血素O抗原 包涵體 自誘導(dǎo) 蛋白純化
【分類號】：R392.1
【正文快照】： 鏈球菌溶血素O抗原(streptolysin O,SLO)是溶血性鏈球菌的代謝產(chǎn)物之一,具有溶血作用和強抗原性。溶血性鏈球菌感染后患者體內(nèi)可檢出SLO抗體,臨床通過檢測血清中有無SLO抗體產(chǎn)生(抗SLO試驗),可以診斷患者近期是否感染過溶血性鏈球菌,也可以用于輔助診斷風(fēng)濕熱、腎小球腎炎等[1

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 戚大梁;王強;易維京;;抗組氨酸標(biāo)簽單克隆抗體的制備、鑒定及應(yīng)用[J];重慶醫(yī)學(xué);2013年32期

2 張晶梅;于魁忠;;C反應(yīng)蛋白、紅細(xì)胞沉降率、抗鏈球菌溶血素“O”在風(fēng)濕性心臟病手術(shù)中的變化及預(yù)測價值[J];臨床合理用藥雜志;2011年09期

3 唐新杰;盛玲玲;張群;謝峰;;鏈球菌溶血素O提高細(xì)胞的通透性[J];中國組織工程研究;2012年46期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 胡仁建;蔡家利;劉利;涂漫語;徐濤;杜翠容;羅佳;丁森;;HPV18E7重組質(zhì)粒的構(gòu)建及在大腸桿菌中的表達優(yōu)化[J];重慶醫(yī)學(xué);2013年30期

2 夏瀾;馮朝艷;黃鑫;陳卓婧;閻淑男;龔云飛;;青霉素結(jié)合蛋白在殘留檢測中的應(yīng)用研究[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2013年19期

3 劉曉穎;姚志利;陳立志;廉士珍;夏小成;馮二凱;;布魯菌外膜蛋白Bp26在大腸埃希菌中的可溶性表達[J];動物醫(yī)學(xué)進展;2014年01期

4 張松;王德正;李娓;李志敏;葉勤;;重組大腸桿菌表達雙功能谷胱甘肽合成酶的發(fā)酵工藝研究[J];化學(xué)與生物工程;2013年08期

5 劉祥;李惠;;大腸埃希菌外膜蛋白OmpA表達質(zhì)粒構(gòu)建和誘導(dǎo)條件優(yōu)化[J];生物技術(shù);2013年04期

6 甄玉萍;裴世春;高建偉;;基于HTS-ELISA的單克隆抗體分泌雜交瘤細(xì)胞篩選技術(shù)進展[J];食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報;2014年07期

7 陳欣麟;錢秀萍;朱建偉;戈梅;陳代杰;毛文偉;;重組人GPx7的原核表達、純化及其抗腫瘤活性檢測[J];中國生物工程雜志;2014年07期

8 王璽;段勝林;熊舒莉;鄭桂蘭;張貴友;王洪鐘;;自誘導(dǎo)系統(tǒng)在酶促合成2’-脫氧胞苷中的應(yīng)用[J];生物技術(shù)通報;2014年11期

9 毛爭爭;柳永;孫燕;周曼;劉子鐸;湯江武;;新型Resilin-R5融合蛋白的大腸桿菌表達和純化[J];浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報;2014年01期

10 周傳文;李益鵬;丁o，

本文編號：826741