本文關(guān)鍵詞：脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨細(xì)胞誘導(dǎo)后的再培養(yǎng)

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【摘要】：目的探索藻酸鹽凝膠中高密度培養(yǎng)脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(ADSCs)成軟骨細(xì)胞誘導(dǎo)后,利用凝膠釋放的細(xì)胞再培養(yǎng)形成軟骨組織的新方法。方法取大鼠腹股溝脂肪組織,Ⅰ型膠原酶消化得到ADSCs原代培養(yǎng),傳代后采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)間充質(zhì)細(xì)胞表面CD90、CD44表達(dá)鑒定細(xì)胞。將第6代細(xì)胞高密度培養(yǎng)于藻酸鈣凝膠中,用軟骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)培養(yǎng)2周,將細(xì)胞放自凝膠中釋放并單層培養(yǎng)成軟骨誘導(dǎo)2周,觀察細(xì)胞變化。培養(yǎng)出的組織塊經(jīng)Ⅱ型膠原酶消化后,行免疫細(xì)胞化學(xué)染色,檢測(cè)軟骨特異性Ⅱ型膠原蛋白的表達(dá)。結(jié)果 ADSCs原代呈梭形生長(zhǎng),傳代后呈規(guī)律排列旋渦狀生長(zhǎng),間充質(zhì)干細(xì)胞表面CD90、CD44呈陽(yáng)性。藻酸鈣-ADSCs成軟骨誘導(dǎo)2周后,釋放出的細(xì)胞貼壁后逐漸聚集,形成一定體積的質(zhì)硬組織塊,免疫組化檢測(cè)顯示,新生組織塊細(xì)胞胞質(zhì)中軟骨特異性Ⅱ型膠原蛋白呈陽(yáng)性表達(dá),表明大鼠ADSCs向軟骨細(xì)胞分化。結(jié)論藻酸鹽凝膠中高密度培養(yǎng)大鼠ADSCs成軟骨細(xì)胞誘導(dǎo)后,利用誘導(dǎo)后的細(xì)胞再培養(yǎng)可形成新的軟骨組織。
【作者單位】： 山東大學(xué)附屬千佛山醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科;
【關(guān)鍵詞】： 脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞 藻酸鹽 軟骨組織 Ⅱ型膠原蛋白
【分類號(hào)】：R329
【正文快照】： 脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)是一種具有多向分化潛能的干細(xì)胞,在特定誘導(dǎo)條件下可以向骨、軟骨、脂肪等組織分化[1]。將ADSCs高密度懸浮培養(yǎng)于藻酸鈣凝膠中成軟骨細(xì)胞誘導(dǎo)是一種應(yīng)用比較成熟的間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)技術(shù),誘導(dǎo)后的細(xì)胞可通過檢測(cè)軟骨特異性

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