本文關(guān)鍵詞：中國林蛙皮膚抗菌肽的分離純化及生物活性研究

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【摘要】：抗菌肽(Antimicrobial peptides)也稱為肽抗生素,是一類小分子多肽,廣泛分布于生物體內(nèi)。兩棲類動(dòng)物皮膚濕潤、裸露,可分泌大量具有抑菌活性的物質(zhì),其中以抗菌肽為主。本研究旨在從中國林蛙皮膚分泌的活性物質(zhì)中提取并進(jìn)一步分離純化出新型的抗菌肽,并對(duì)其生物學(xué)活性進(jìn)行研究,為兩棲類動(dòng)物抗菌肽的研究奠定基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)蛙間斷性電刺激,超純水收集產(chǎn)生的分泌物,反相高效液相色譜對(duì)分泌物分離純化,將金黃色葡萄球菌(ATCC25923)作為活性試驗(yàn)指示菌進(jìn)行抑菌效果檢測(cè),獲得1種抑菌效果較強(qiáng)的抗菌肽,經(jīng)MALDI-TOF MS質(zhì)譜鑒定,該抗菌肽純度達(dá)95%以上,序列鑒定表明該抗菌肽的氨基酸序列為FLPFFAACAITKKC(8和14位之間形成二硫鍵),將其命名為AMP-1。利用多肽固相合成中國林蛙抗菌肽AMP-1、分離純化,經(jīng)抑菌活性檢測(cè)及質(zhì)譜鑒定,獲得目的抗菌肽AMP-1。MIC結(jié)果表明:AMP-1對(duì)金黃色葡萄球菌(ATCC25923)和大腸桿菌(ATCC25922)有抑制作用,對(duì)多重耐藥菌株也有一定的抑制效果;溶血試驗(yàn)結(jié)果表明:AMP-1最高濃度時(shí)溶血率僅為1.108%;抗腫瘤活性試驗(yàn)結(jié)果顯示:AMP-1對(duì)人乳腺癌細(xì)胞MCF-7的生長(zhǎng)有很強(qiáng)的抑制作用,最高濃度時(shí)抑制率可達(dá)75.8%,且最低濃度時(shí)仍有抑制作用;抗弓形蟲活性試驗(yàn)結(jié)果顯示:AMP-1對(duì)弓形蟲的抑制作用隨濃度的增大而增強(qiáng),隨著時(shí)間的延長(zhǎng)也會(huì)增強(qiáng)。作用72h,50μg/mL的AMP-1對(duì)弓形蟲的抑制率高達(dá)72.5%,而最低濃度時(shí)對(duì)弓形蟲仍具有抑制作用。
【關(guān)鍵詞】：抗菌肽 中國林蛙 分離純化 抑菌活性
【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R3411;Q51
【目錄】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-7
• 英文縮略詞表7-8
• 前言8-9
• 第一章 文獻(xiàn)綜述9-18
• 1.1 抗菌肽簡(jiǎn)介9-10
• 1.2 起源10
• 1.3 抗菌肽的分類10-13
• 1.4 抗菌肽的生物活性13-14
• 1.5 抗菌肽抑制寄生蟲的作用機(jī)理14-15
• 1.6 抗菌肽的應(yīng)用15-17
• 1.7 展望17
• 1.8 本研究的目的及意義17-18
• 第二章 中國林蛙皮膚抗菌肽的分離純化及序列鑒定18-32
• 2.1 材料18-19
• 2.2 方法19-22
• 2.3 結(jié)果22-30
• 2.4 討論30-31
• 2.5 小結(jié)31-32
• 第三章 中國林蛙皮膚抗菌肽生物學(xué)活性研究32-44
• 3.1 材料32-33
• 3.2 方法33-36
• 3.3 結(jié)果36-41
• 3.4 討論41-42
• 3.5 小結(jié)42-44
• 第四章 結(jié)論44-45
• 參考文獻(xiàn)45-51
• 作者簡(jiǎn)介51-52
• 致謝52

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 岳昌武;莫寧萍;劉坤祥;凌鋅;曾霓;;抗菌肽的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)·作用機(jī)理及其應(yīng)用前景[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年05期

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本文編號(hào)：777701