本文關(guān)鍵詞：雞源與人源大腸桿菌主要耐藥基因檢測(cè)及其傳遞規(guī)律分析

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【摘要】：近年來(lái),隨著遼寧省畜禽養(yǎng)殖規(guī)模迅速發(fā)展,大量抗菌藥物廣泛用于預(yù)防畜禽疾病,導(dǎo)致大腸桿菌耐藥性的產(chǎn)生和傳播越來(lái)越嚴(yán)重。為明確大腸桿菌耐藥性產(chǎn)生的原因和發(fā)展趨勢(shì),建立預(yù)防耐藥性產(chǎn)生和消除的方法,解決細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性對(duì)我國(guó)動(dòng)物疾病防治和公共衛(wèi)生安全帶來(lái)的危害,開(kāi)展了雞源與人源大腸桿菌主要耐藥基因的檢測(cè)及同源性分析,并對(duì)其耐藥基因的傳遞規(guī)律進(jìn)一步分析驗(yàn)證,為指導(dǎo)臨床合理用藥及對(duì)人和動(dòng)物大腸桿菌病的防控提供科學(xué)依據(jù)。1.雞源大腸桿菌耐藥性跟蹤檢測(cè)對(duì)2012~2015年從遼寧省某規(guī)模化肉雞養(yǎng)殖場(chǎng)分離獲得的218株雞源大腸桿菌,采用微量稀釋法進(jìn)行了14種獸用和16種人用抗菌藥的藥物敏感性測(cè)定,并參照CLSI制定的腸桿菌判定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定。結(jié)果顯示,雞源大腸桿菌對(duì)獸用藥氨芐西林、恩諾沙星、復(fù)方新諾明、磺胺異VA唑、四環(huán)素和人用藥哌拉西林、替卡西林、環(huán)丙沙星都產(chǎn)生顯著耐藥性,平均耐藥率達(dá)60%以上,而且其耐藥性總體上均呈現(xiàn)逐年上升的趨勢(shì)。對(duì)4年間所分離的雞源大腸桿菌耐藥性檢測(cè)結(jié)果與EUCAST發(fā)布的野生型菌株最小抑菌濃度(MIC)值分布進(jìn)行比較分析,耐藥范圍基本一致,但對(duì)大觀霉素、氨芐西林、恩諾沙星、復(fù)方新諾明等藥物的MIC值發(fā)生了明顯右移,表明該肉雞場(chǎng)大腸桿菌對(duì)上述抗菌藥的耐藥強(qiáng)度呈現(xiàn)逐漸增強(qiáng)的趨勢(shì)。耐藥率較高并逐年顯著增強(qiáng)的藥物品種,如四環(huán)素、氟苯尼考等均是雞場(chǎng)長(zhǎng)期使用的藥物,說(shuō)明細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生與長(zhǎng)期使用密切相關(guān)。2.雞源與人源大腸桿菌耐藥基因檢測(cè)及同源性分析對(duì)分離獲得的雞源和人源大腸桿菌進(jìn)行14種獸用和16種人用抗菌藥的藥物敏感性測(cè)定,結(jié)果顯示,雞源和人源大腸桿菌共同產(chǎn)生表觀耐藥的獸用抗菌藥有10種,人用抗菌藥有6種。對(duì)分離菌株選取共同耐藥率較高的6類抗菌藥物的10種主要相關(guān)基因進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果顯示雞源和人源大腸桿菌共同攜帶的耐藥基因有7種,其中g(shù)yrA和gyrB的檢出率均達(dá)到100%;對(duì)共同攜帶的耐藥基因進(jìn)行核苷酸同源性分析,結(jié)果顯示gyrB、sul2、TEM的同源性較高,分別為100%、99.55%、99.38%,mcr-1、floR、gyrA同源性也達(dá)到90%以上,分別為98.23%、97.75%、93.33%。研究表明該肉雞場(chǎng)雞源和人源大腸桿菌共同對(duì)多種常用獸用和人用抗菌藥產(chǎn)生表觀耐藥性,部分相關(guān)耐藥基因具有高度同源性,表明細(xì)菌耐藥性及其相關(guān)基因可能在肉雞場(chǎng)雞源和人源大腸桿菌中傳播。3.不同來(lái)源大腸桿菌耐藥菌株的同源性與耐藥性比較分析對(duì)分離獲得的雞源和人源大腸桿菌,應(yīng)用脈沖場(chǎng)凝膠電泳方法進(jìn)行分子分型鑒定,比較不同來(lái)源耐藥菌株的基因型,進(jìn)行遺傳相關(guān)性分析,以證明攜帶同種耐藥基因的菌株是否在雞和人以及不同個(gè)體之間傳播,并與大腸桿菌表觀耐藥譜型進(jìn)行比較分析。結(jié)果顯示,同一肉雞場(chǎng)內(nèi)動(dòng)物與飼養(yǎng)員及不同個(gè)體之間都存在PFGE圖譜完全相同的菌株。說(shuō)明攜帶同種耐藥基因的菌株可能在肉雞和飼養(yǎng)員及不同個(gè)體中水平傳播。對(duì)不同來(lái)源大腸桿菌的PFGE分型和藥敏結(jié)果進(jìn)行比較可知,相同PFGE分型的菌株其耐藥譜型不一定相同,而不同PFGE分型的菌株其耐藥譜型可能相同。提示一是耐藥基因的復(fù)雜性和多樣性,二是同一克隆型的菌株在增殖播散的過(guò)程中可能存在耐藥質(zhì)粒的獲取或丟失導(dǎo)致耐藥性改變,而不同克隆株之間可能通過(guò)耐藥質(zhì)粒水平傳播耐藥性。4.攜帶耐藥基因大腸桿菌的轉(zhuǎn)接試驗(yàn)為確證雞源與人源大腸桿菌耐藥性是否發(fā)生水平傳播,對(duì)分離的耐藥菌株進(jìn)行質(zhì)粒轉(zhuǎn)化試驗(yàn),以攜帶可轉(zhuǎn)化成功質(zhì)粒的菌株作供體菌,大腸埃希菌J53作受體菌進(jìn)行質(zhì)粒接合轉(zhuǎn)移試驗(yàn),判定陽(yáng)性質(zhì)粒是否發(fā)生交互傳播,檢測(cè)接合子耐藥性、耐藥基因及PFGE譜型。結(jié)果顯示,接合子檢出耐藥基因mcr-1、floR、sul2。耐藥性檢測(cè)接合子對(duì)所對(duì)應(yīng)的藥物多粘菌素、氟苯尼考和磺胺異VA唑產(chǎn)生了耐藥,說(shuō)明耐藥基因可通過(guò)質(zhì)粒介導(dǎo)在大腸桿菌不同來(lái)源菌株之間水平傳播,進(jìn)而傳播耐藥性。研究證明雞源大腸桿菌如果存在較高耐藥性,就可能通過(guò)養(yǎng)殖環(huán)節(jié)向人源大腸桿菌傳遞。
【關(guān)鍵詞】：雞源大腸桿菌 人源大腸桿菌 耐藥基因 同源性 傳遞規(guī)律
【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S852.61;R378.21
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-10
• 前言10-11
• 第一篇 文獻(xiàn)綜述11-20
• 第一章 大腸桿菌及其耐藥性概述11-14
• 1.1 動(dòng)物源性大腸桿菌概述11
• 1.2 大腸桿菌耐藥性發(fā)展歷史和研究現(xiàn)狀11-12
• 1.3 大腸桿菌耐藥基因研究現(xiàn)狀12-14
• 第二章 大腸桿菌耐藥性產(chǎn)生與互傳機(jī)制研究14-20
• 2.1 大腸桿菌耐藥性產(chǎn)生機(jī)制14-15
• 2.2 大腸桿菌對(duì)不同抗菌藥物的耐藥機(jī)制15-16
• 2.3 大腸桿菌耐藥性傳播機(jī)制16-20
• 第二篇 研究?jī)?nèi)容20-63
• 第一章 雞源大腸桿菌耐藥性跟蹤檢測(cè)20-29
• 1.1 材料與方法20-22
• 1.2 結(jié)果與分析22-27
• 1.3 討論27-28
• 1.4 小結(jié)28-29
• 第二章 雞源與人源大腸桿菌耐藥基因檢測(cè)及同源性分析29-47
• 2.1 材料與方法29-34
• 2.2 結(jié)果分析34-44
• 2.3 討論44-45
• 2.4 小結(jié)45-47
• 第三章 不同來(lái)源大腸桿菌耐藥菌株的同源性與耐藥性比較分析47-53
• 3.1 材料與方法47-49
• 3.2 結(jié)果與分析49-51
• 3.3 討論51-52
• 3.4 小結(jié)52-53
• 第四章 攜帶耐藥基因大腸桿菌的轉(zhuǎn)接試驗(yàn)53-63
• 4.1 材料與方法53-55
• 4.2 結(jié)果與分析55-61
• 4.3 討論61-62
• 4.4 小結(jié)62-63
• 結(jié)論63-64
• 參考文獻(xiàn)64-71
• 作者簡(jiǎn)介71-72
• 致謝72

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王影;李欣南;韓鐫竹;劉英姿;王宏軍;高慎陽(yáng);周鐵忠;;大腸桿菌耐藥性產(chǎn)生與傳播機(jī)制研究現(xiàn)狀[J];現(xiàn)代畜牧獸醫(yī);2016年01期

2 王影;李欣南;韓鐫竹;劉英姿;王宏軍;高慎陽(yáng);吳思思;張利勃;周鐵忠;;某肉雞場(chǎng)雞源大腸桿菌耐藥性跟蹤檢測(cè)與分析[J];中國(guó)畜牧獸醫(yī);2015年12期

3 劉五高;丁友法;劉愛(ài)霞;黃黎俐;金晶;王偉;;質(zhì)粒介導(dǎo)的耐藥基因水平傳播研究進(jìn)展[J];中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志;2015年08期

4 張忠;曾瑾;鄧光存;;寧夏地區(qū)162株大腸桿菌臨床分離株對(duì)磺胺類藥物的耐藥性分析[J];寧夏大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2014年01期

5 馮世文;曾蕓;李軍;楊威;陳澤祥;;細(xì)菌對(duì)氟苯尼考的耐藥機(jī)制研究[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2014年05期

6 王禮偉;施研進(jìn);屈勇剛;梁晏;李飛;楊亞?wèn)|;楊一鳴;王曉蘭;;新疆石河子地區(qū)奶牛乳房炎大腸桿菌的分離鑒定及耐藥性分析[J];中國(guó)畜牧獸醫(yī);2014年01期

7 王春曉;王曉宇;劉桂榮;劉樹(shù)林;;72株大腸埃希菌參考菌株的基因組分型及種系發(fā)育關(guān)系[J];哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2013年06期

8 張立平;張忠;曾瑾;包少文;鄧光存;;寧夏地區(qū)162株大腸桿菌臨床分離株對(duì)四環(huán)素類藥物的耐藥性分析[J];廣東醫(yī)學(xué);2013年23期

9 余婷;安慧慧;吳聰明;王桂琴;;奶牛乳房炎分離大腸桿菌的耐藥性及脈沖場(chǎng)凝膠電泳分型研究[J];中國(guó)獸醫(yī)雜志;2013年09期

10 閆明媚;孫永祥;李惠蘭;李樹(shù)博;趙剛;吳洪濤;;遼寧省禽大腸桿菌優(yōu)勢(shì)菌血清型菌株耐藥性研究與分析[J];現(xiàn)代畜牧獸醫(yī);2013年04期

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本文編號(hào)：774173