本文關(guān)鍵詞：低溫凍存對(duì)人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性的影響

  更多相關(guān)文章： 人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞 凍存 生物學(xué)特性 干細(xì)胞庫

【摘要】：目的:比較人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(human adipose-derived mesenchymal stem cells,hADSCs)凍存前和復(fù)蘇后的生物學(xué)特性,為今后建立低溫干細(xì)胞庫提供實(shí)驗(yàn)支持。方法:采用0.1%Ⅰ型膠原酶消化法從腹部大網(wǎng)膜脂肪組織中分離hADSCs,體外培養(yǎng)擴(kuò)增,將處于均一穩(wěn)定生長(zhǎng)狀態(tài)的第3代hADSCs置于液氮中分別凍存1、3和6個(gè)月,復(fù)蘇后臺(tái)盼藍(lán)染色檢測(cè)細(xì)胞存活率,采用MTT法繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表面抗原,成脂成骨誘導(dǎo)后鑒定多向分化能力,RT-PCR檢測(cè)成脂特異性基因過氧化物酶體增殖物激活受體γ-2(peroxisome proliferator-activated receptorγ-2,PPARγ-2)和成骨特異性基因骨鈣素(osteocalcin,OC)的表達(dá)情況。結(jié)果:隨凍存時(shí)間的延長(zhǎng)細(xì)胞存活率略有下降,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。MTT結(jié)果顯示凍存前后細(xì)胞增殖能力均很強(qiáng)。流式細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果顯示凍存前后細(xì)胞均高表達(dá)CD29、CD44、CD73、CD90、CD105和CD166,低表達(dá)CD45和HLA-DR。凍存前后hADSCs均具有向脂肪細(xì)胞和骨細(xì)胞分化潛能,且RT-PCR結(jié)果顯示,PPARγ-2和骨鈣素mRNA的表達(dá)凍存前后差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:經(jīng)液氮凍存后的hADSCs具有高存活率,生物學(xué)特性保持穩(wěn)定且仍具有多向分化潛能。
【作者單位】： 江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院皮膚科;
【關(guān)鍵詞】： 人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞 凍存 生物學(xué)特性 干細(xì)胞庫
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(30972663)
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(adipose-derived mesenchy-mal stem cells,ADSCs)是來源于脂肪組織的間充質(zhì)干細(xì)胞,由于取材方便、對(duì)機(jī)體損傷小且易于體外培養(yǎng),已在再生醫(yī)學(xué)研究中受到廣泛關(guān)注。近期有研究顯示,hADSCs免疫原性低,不表達(dá)HLAⅡ類抗原且能調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞的活性[1],可以用于移

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本文編號(hào)：765101