發(fā)布時(shí)間：2017-08-31 10:33

  本文關(guān)鍵詞：環(huán)氧酶-2在骨形態(tài)蛋白9誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞骨向分化中的作用研究

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【摘要】：目的研究環(huán)氧酶-2(COX-2)在骨形態(tài)蛋白9(BMP9)誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)成骨分化過程中的作用,以及COX-2影響B(tài)MP9功能的可能機(jī)制。方法采用定量PCR、蛋白印跡和免疫細(xì)胞化學(xué)染色分析BMP9對(duì)COX-2表達(dá)的影響。采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)堿性磷酸酶(ALP)的活性,用RT-PCR法檢測(cè)Smad6、Smad7 mRNA表達(dá)水平,用蛋白印跡檢測(cè)Runx2、Dlx-5、Smad1/5/8及磷酸化Smad1/5/8蛋白水平。通過體內(nèi)異位成骨實(shí)驗(yàn)檢測(cè)COX-2對(duì)BMP9誘導(dǎo)MSCs成骨分化的影響。利用螢光素酶報(bào)告質(zhì)粒檢測(cè)BMPs/Smads信號(hào)活化程度。結(jié)果 BMP9明顯誘導(dǎo)COX-2表達(dá),抑制COX-2酶活性或沉默COX-2均抑制BMP9誘導(dǎo)C3H10T1/2細(xì)胞ALP活性增加。沉默COX-2明顯抑制BMP9誘導(dǎo)C3H10T1/2細(xì)胞表達(dá)Runx2和Dlx-5,以及BMP9誘導(dǎo)的C3H10T1/2細(xì)胞異位成骨。沉默COX-2抑制BMPR-Smad報(bào)告質(zhì)粒螢光素酶活性,降低Smad1/5/8的磷酸化水平,以及抑制Smad6和Smad7的mRNA表達(dá)。結(jié)論 COX-2對(duì)BMP9誘導(dǎo)MSCs成骨分化具有重要調(diào)節(jié)作用,其機(jī)制可能與COX-2調(diào)節(jié)BMPs/Smads信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)有關(guān)。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)藥理學(xué)教研室;重慶市生物化學(xué)與分子藥理學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 環(huán)氧酶- 骨形態(tài)蛋白 間充質(zhì)干細(xì)胞 成骨分化 BMPs/Smads信號(hào) 磷酸化
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No 81071462,81372120)
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cell,MSCs)具有定向分化為成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞及肌細(xì)胞的能力。MSCs是再生領(lǐng)域中一種理想的種子細(xì)胞,在臨床治療骨缺損及骨不連接等疾病中有巨大的潛能[1]。近年來研究表明,環(huán)氧酶-2(cycloxy-genase-2,COX-2)在骨折愈合和MSCs成骨分

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