本文關(guān)鍵詞：高效液相色譜-柱后同位素稀釋質(zhì)譜法定量分析人血清中轉(zhuǎn)鐵蛋白及白蛋白

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【摘要】：建立了高效液相色譜(HPLC)與電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)聯(lián)用,同時結(jié)合柱后同位素稀釋法,通過直接測定硫及鐵元素,實現(xiàn)蛋白質(zhì)絕對定量的分析方法。選取分子量不同的4種標準蛋白:轉(zhuǎn)鐵蛋白、β乳球蛋白、肌紅蛋白和溶菌酶作為混合蛋白,34S或54Fe同位素稀釋劑與液相色譜洗脫液經(jīng)三通混合后,在線進入ICP-MS檢測。根據(jù)同位素稀釋法公式及蛋白中硫、鐵的含量計算混合蛋白中每種蛋白的濃度,與天平稱量結(jié)果一致,對方法進行了驗證。將方法應(yīng)用到人血清轉(zhuǎn)鐵蛋白、白蛋白的定量分析,針對兩種蛋白含量差別大導(dǎo)致的信號差異,通過改變同位素稀釋劑的流速,成功測定了人血清中轉(zhuǎn)鐵蛋白、白蛋白的含量。采用34S及54Fe同位素稀釋劑分別定量的血清中轉(zhuǎn)鐵蛋白濃度為(2.35±0.01)g/L和(2.22±0.13)g/L,結(jié)果基本吻合。方法精密度RSD均小于10%,可用于基體樣品中含硫蛋白及金屬蛋白的定量分析。
【作者單位】： 北京化工大學(xué)材料科學(xué)與工程學(xué)院;中國計量科學(xué)研究院;
【關(guān)鍵詞】： 同位素稀釋 蛋白質(zhì)定量 電感耦合等離子體質(zhì)譜 轉(zhuǎn)鐵蛋白 白蛋白
【基金】：國家質(zhì)檢總局公益性行業(yè)科研專項(No.201110008)資助項目
【分類號】：R341;O657.63
【正文快照】： 1引言蛋白質(zhì)組學(xué)的快速發(fā)展,不但需要準確鑒定蛋白質(zhì),還要求對處于動態(tài)變化的蛋白質(zhì)進行定量分析[1~4]。目前比較成熟的定量方法多是基于穩(wěn)定同位素標記的生物質(zhì)譜[5,6],但是生物質(zhì)譜的信號響應(yīng)與蛋白質(zhì)或肽段含量間的關(guān)系十分復(fù)雜,沒有蛋白質(zhì)標準作歸一化處理,很難對蛋白質(zhì)

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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【相似文獻】

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中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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本文編號：751657