本文關(guān)鍵詞：乙型腦炎病毒NS1蛋白原核表達及其免疫原性分析

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【摘要】：目的采用大腸桿菌系統(tǒng)表達乙腦病毒NS1蛋白,并對表達產(chǎn)物進行免疫原性分析。方法將乙腦病毒NS1基因克隆入pET30a載體中,表達產(chǎn)物經(jīng)Ni+親和層析純化后行SDS-PAGE和Western blot分析;并將純化產(chǎn)物免疫新西蘭大白兔,獲得的免疫血清作間接ELISA及免疫熒光檢測。結(jié)果重組JEV NS1蛋白獲得表達并純化成功;Western blot結(jié)果顯示純化蛋白能與JEV免疫的鼠多克隆腹水反應(yīng);兔免疫血清的間接ELISA結(jié)果顯示血清效價達到1∶51 200以上;免疫熒光結(jié)果顯示血清作1∶50、1∶100、1∶200稀釋時,JEV感染的BHK細胞均顯示熒光。結(jié)論重組NS1蛋白能在大腸桿菌系統(tǒng)中獲得表達;純化產(chǎn)物具有免疫原性,為進一步研究NS1蛋白的生物學(xué)特性及乙腦病毒的診斷試劑提供參考依據(jù)。
【作者單位】： 貴陽醫(yī)學(xué)院公共衛(wèi)生學(xué)院環(huán)境衛(wèi)生學(xué)教研室;中國疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所;
【關(guān)鍵詞】： 乙型腦炎病毒 非結(jié)構(gòu)蛋白 原核表達 免疫原性
【基金】：國家“十二五”科技重大專項(2012ZX10004219)
【分類號】：R373
【正文快照】： 流行性乙型腦炎病毒(epidemic encephalitis Bvirus)又稱日本腦炎病毒(Japanese encephalits vi-rus,JEV),可引起以中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害為主的急性傳染病,在中國多省均有流行報道[1-2]。JEV是黃病毒科黃病毒屬的成員,為單股正鏈RNA病毒,基因組長約ll kb,基因結(jié)構(gòu)為含5'和3'非編碼

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本文編號：734162