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針對HSV-2LATORF的siRNA在病毒潛伏激活中的作用

發(fā)布時間:2017-08-22 06:38

  本文關(guān)鍵詞:針對HSV-2LATORF的siRNA在病毒潛伏激活中的作用


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【摘要】:目的觀察皰疹病毒2型潛伏相關(guān)轉(zhuǎn)錄子開放閱讀框架(HSV-2 LAT ORF)在病毒潛伏感染激活中的作用。方法體外建立HSV-2潛伏感染及復(fù)發(fā)的神經(jīng)細(xì)胞模型,對病毒在細(xì)胞中的潛伏和激發(fā)進(jìn)行PCR驗證及測序;設(shè)計針對LAT ORF的siRNA,激活誘導(dǎo)后轉(zhuǎn)染SH-SY5Y細(xì)胞,檢測轉(zhuǎn)染前后LAT ORF的表達(dá)改變;制備HSV-2基因表達(dá)譜芯片,利用芯片分析抑制LAT ORF后病毒基因表達(dá)的改變。結(jié)果在人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株SH-SY5Y上成功建立了HSV-2潛伏感染及激活的細(xì)胞模型,LAT、gG基因PCR擴增及電泳結(jié)果證實了病毒在細(xì)胞中的潛伏及激活;LAT ORF-siRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞24、36、48h后,LAT ORF mRNA的表達(dá)水平分別降低了39%、51%和60%。基因芯片分析干擾后病毒基因表達(dá),共有28個基因出現(xiàn)差異表達(dá),其中24個基因下調(diào),4個基因上調(diào)。結(jié)論 LAT ORF在HSV-2潛伏感染激活中發(fā)揮了重要作用,為下一步分析LAT在病毒潛伏激活中的調(diào)控機制奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院檢驗科;南方醫(yī)科大學(xué)基因工程研究所;廣州南沙欖核醫(yī)院檢驗科;
【關(guān)鍵詞】皰疹病毒型 病毒潛伏期 RNA干擾 寡核苷酸序列分析
【基金】:廣東省科技計劃項目(2011B061300021)~~
【分類號】:R373
【正文快照】: 皰疹病毒2型(HSV-2)是人類病毒性疾病的常見病原體之一,其潛伏感染及激發(fā)是生殖器皰疹易復(fù)發(fā)、難根治的主要原因。潛伏相關(guān)轉(zhuǎn)錄子(LAT)編碼蛋白在HSV感染的復(fù)發(fā)中起重要作用,是研究HSV感染復(fù)發(fā)過程中信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑及特異性基因治療的理想靶標(biāo)。本研究建立穩(wěn)定的HSV-2潛伏感染及

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3 寸偉;郭磊;張瑩;劉龍丁;王麗春;李建峰;董承紅;王晶晶;李琦涵;;HSV-1立即早期蛋白ICP22與VP16共同參與α基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控的初步分析[J];中國科學(xué)(C輯:生命科學(xué));2008年12期

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7 張s,

本文編號:717625


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