本文關(guān)鍵詞：針對(duì)HSV-2LATORF的siRNA在病毒潛伏激活中的作用

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【摘要】：目的觀察皰疹病毒2型潛伏相關(guān)轉(zhuǎn)錄子開(kāi)放閱讀框架(HSV-2 LAT ORF)在病毒潛伏感染激活中的作用。方法體外建立HSV-2潛伏感染及復(fù)發(fā)的神經(jīng)細(xì)胞模型,對(duì)病毒在細(xì)胞中的潛伏和激發(fā)進(jìn)行PCR驗(yàn)證及測(cè)序;設(shè)計(jì)針對(duì)LAT ORF的siRNA,激活誘導(dǎo)后轉(zhuǎn)染SH-SY5Y細(xì)胞,檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后LAT ORF的表達(dá)改變;制備HSV-2基因表達(dá)譜芯片,利用芯片分析抑制LAT ORF后病毒基因表達(dá)的改變。結(jié)果在人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株SH-SY5Y上成功建立了HSV-2潛伏感染及激活的細(xì)胞模型,LAT、gG基因PCR擴(kuò)增及電泳結(jié)果證實(shí)了病毒在細(xì)胞中的潛伏及激活;LAT ORF-siRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞24、36、48h后,LAT ORF mRNA的表達(dá)水平分別降低了39%、51%和60%。基因芯片分析干擾后病毒基因表達(dá),共有28個(gè)基因出現(xiàn)差異表達(dá),其中24個(gè)基因下調(diào),4個(gè)基因上調(diào)。結(jié)論 LAT ORF在HSV-2潛伏感染激活中發(fā)揮了重要作用,為下一步分析LAT在病毒潛伏激活中的調(diào)控機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院檢驗(yàn)科;南方醫(yī)科大學(xué)基因工程研究所;廣州南沙欖核醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【關(guān)鍵詞】： 皰疹病毒型 病毒潛伏期 RNA干擾 寡核苷酸序列分析
【基金】：廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2011B061300021)~~
【分類號(hào)】：R373
【正文快照】： 皰疹病毒2型(HSV-2)是人類病毒性疾病的常見(jiàn)病原體之一,其潛伏感染及激發(fā)是生殖器皰疹易復(fù)發(fā)、難根治的主要原因。潛伏相關(guān)轉(zhuǎn)錄子(LAT)編碼蛋白在HSV感染的復(fù)發(fā)中起重要作用,是研究HSV感染復(fù)發(fā)過(guò)程中信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑及特異性基因治療的理想靶標(biāo)。本研究建立穩(wěn)定的HSV-2潛伏感染及

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本文編號(hào)：717625