本文關(guān)鍵詞：人博卡病毒VP2病毒樣顆粒的表達(dá)、純化及鑒定

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【摘要】：目的通過桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞表達(dá)體系,獲得純重組人博卡病毒(HBoV)病毒蛋白2(VP2)病毒樣顆粒,為HBoV的血清學(xué)檢測(cè)方法的建立及疫苗研究提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法采用含有HBoV VP2基因的重組桿狀病毒感染草地夜蛾9(SF9)細(xì)胞,一定時(shí)間后收集細(xì)胞及上清,經(jīng)氯化銫(CsCl)不連續(xù)密度梯度超速離心后,獲得高純度人博卡病毒VP2病毒樣顆粒。SDS-PAGE鑒定目的蛋白的純度和分子量,透射電鏡觀察病毒樣顆粒結(jié)構(gòu),Western blotting鑒定蛋白的抗原性。結(jié)果 SDS-PAGE結(jié)果顯示該研究獲得的重組HBoV VP2病毒樣顆粒分子量約為60kD,無明顯雜帶;該研究獲得的HBoV VP2病毒樣顆粒能和鼠抗人博卡病毒VP2多克隆抗體結(jié)合;電鏡下HBoV VP2病毒樣顆粒為對(duì)稱正二十面體結(jié)構(gòu),直徑約為20~25 nm。結(jié)論該研究成功獲得高純度的重組HBoV VP2病毒樣顆粒,可用于人博卡病毒感染的血清學(xué)及免疫學(xué)研究。
【作者單位】： 湖南省人民醫(yī)院檢驗(yàn)科;中國(guó)疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所;
【關(guān)鍵詞】： 人博卡病毒 VP病毒樣顆粒 蛋白純化
【基金】：湖南省科技廳科研條件創(chuàng)新專項(xiàng)計(jì)劃(No:2012TT2004)
【分類號(hào)】：R373
【正文快照】： 人博卡病毒(human bocavirus,HBoV)是AL-LANDER等[1]2005年發(fā)現(xiàn)的一種新病毒,研究結(jié)果顯示HBoV在全世界范圍內(nèi)廣泛流行[2]。HBoV共有4種基因型,分別為HBoV1~4[3],研究顯示HBoV1主要與嬰幼兒上下呼吸道感染密切相關(guān),而HBoV2~4主要引起嬰幼兒腹瀉,其中又以HBoV2為主[2]。目前HBo

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前8條

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7 鄧雪鋒;人類博卡病毒感染性克隆的構(gòu)建及體外感染模型的研究[D];華中師范大學(xué);2013年

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 歐陽錦鳳;人博卡病毒結(jié)構(gòu)蛋白VP1u，，非結(jié)構(gòu)蛋白ORFx和NP1的原核表達(dá)與抗體制備[D];華中師范大學(xué);2011年

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8 彭穎;2012-2013年長(zhǎng)沙地區(qū)急性下呼吸道感染住院兒童病毒譜流行病學(xué)調(diào)查[D];湖南師范大學(xué);2014年

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10 李玲;不同檢測(cè)方法在兒童急性下呼吸道人博卡病毒感染診斷中的應(yīng)用[D];蘇州大學(xué);2014年

【相似文獻(xiàn)】

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5 李曉楠;曹明慧;李培鋒;;新腸道病毒71型病毒樣顆粒的制備[J];中國(guó)免疫學(xué)雜志;2012年11期

6 單軍;葛以躍;戚宇華;張文帥;李顯;崔侖標(biāo);;含腸道病毒5'端非編碼區(qū)部分核糖核酸序列病毒樣顆粒的構(gòu)建[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2010年10期

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8 王健偉,姜慧英,屈建國(guó),趙同興,洪濤;同時(shí)表達(dá)藍(lán)舌病毒四個(gè)主要結(jié)構(gòu)蛋白可裝配成病毒樣顆粒[J];病毒學(xué)報(bào);2000年02期

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中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前7條

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7 胡仲廉;焉晉絢;查世欽;劉克相;方華;劉靜敏;戈士文;;病毒樣顆�！环N與食管癌密切相關(guān)的實(shí)體結(jié)構(gòu)及其立體構(gòu)型[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第五次會(huì)議論文摘要匯編[C];1992年

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7 范國(guó)成;水稻瘤矮病毒病毒樣顆粒組裝及Pns12蛋白的亞細(xì)胞定位[D];福建農(nóng)林大學(xué);2008年

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本文編號(hào)：696956