貴州省蚋類攜帶病原體和宿主種類的篩查
發(fā)布時(shí)間:2017-08-07 18:34
本文關(guān)鍵詞:貴州省蚋類攜帶病原體和宿主種類的篩查
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【摘要】:目的:(1)利用DNA條形碼(DNA barcode,線粒體細(xì)胞色素C氧化酶亞基I基因5'端)和形態(tài)學(xué)特征鑒定貴州省蚋類物種;(2)以線粒體細(xì)胞色素b基因(Cytb)的特定區(qū)域及乙型肝炎基因序列為遺傳標(biāo)記,對(duì)貴州省蚋類攜帶的病原體及宿主種類進(jìn)行篩查。方法:(1)標(biāo)本來源:利用車載式捕蟲網(wǎng)于2014年7-9月在貴州省7縣(雷山、榕江、三穗、江口、德江、關(guān)嶺、開陽)采集蚋類標(biāo)本,每個(gè)地區(qū)設(shè)1-2個(gè)采集點(diǎn);(2)標(biāo)本處理:常規(guī)固定并形態(tài)學(xué)初步鑒定,解剖鏡下切尾器制片;(3)蚋類物種鑒定:提取雌蚋DNA,PCR擴(kuò)增蚋類COI基因并測(cè)序,使用生命數(shù)據(jù)條形碼系統(tǒng)及系統(tǒng)發(fā)育方法進(jìn)行分析,并結(jié)合形態(tài)學(xué)特征,鑒定蚋類物種;(4)蚋類病原體種類篩查:PCR分別擴(kuò)增原蟲Cytb基因及乙肝病毒基因并測(cè)序,根據(jù)在Gen Bank中的比對(duì)結(jié)果判斷病原體種類;(5)蚋類吸血宿主種類篩查:PCR擴(kuò)增哺乳動(dòng)物和鳥類Cytb基因并測(cè)序,根據(jù)在Gen Bank中的比對(duì)結(jié)果判斷宿主種類。結(jié)果:(1)共采獲昆蟲標(biāo)本49,622頭,除1頭雙尾綱昆蟲外,均屬昆蟲綱,分類為8目145科,其中鞘翅目(Coleoptera)38科,雙翅目(Diptera)37科,鱗翅目(Lepidoptera)30科,膜翅目(Hymenoptera)29科,半翅目(Hemiptera)7科,蜻蜓目(Odonata)2科,堾翅目(Plecoptera)1科,脈翅目(Neuroptera)1科。(2)采獲蚋類標(biāo)本702頭,其中雌蚋531頭,雄蚋171頭,PCR擴(kuò)增雌蚋COI基因后,獲得521頭的DNA條形碼序列,經(jīng)鑒定包括1屬23種。(3)初步確定劃分蚋屬下蚋種的Kimura 2-parameter(K2P)距離閾值為4%,利用該閾值、生命數(shù)據(jù)條形碼系統(tǒng)、系統(tǒng)發(fā)育分析及形態(tài)學(xué)特征鑒定麻子繩蚋(Simulium asakoae)153頭,五條蚋(Simulium quinquestriatum)156頭,雙齒蚋(Simulium bidentatum)97頭,昌隆蚋(Simulium chamlongi)9頭,裝飾短蚋(Simulium ornatum)2頭,紅頭厭蚋(Simulium erythrocephala)1頭,待定種(Simulium spp.)17種103頭。(4)原蟲類病原體的PCR擴(kuò)增結(jié)果均為陰性。(5)在1頭雌蚋(五條蚋)中擴(kuò)增出乙型肝病毒基因序列。(6)在4頭雌蚋中篩查到1例人Cytb基因序列(蚋種為麻子繩蚋),2例鳥類Cytb基因序列(蚋種為雙齒蚋和待定種),1例為家山羊Cytb基因序列(蚋種為雙齒蚋)。結(jié)論:(1)共鑒定蚋種23種,包括麻子繩蚋、五條蚋、雙齒蚋、昌隆蚋、裝飾短蚋和紅頭厭蚋等6個(gè)已知種,以及17個(gè)待定種,其中,麻子繩蚋為貴州省蚋類新記錄;(2)未篩查到蚋類攜帶的原蟲類病原體;(3)在1頭五條蚋中發(fā)現(xiàn)與乙型肝炎病毒基因序列一致的序列;(4)貴州省蚋類吸血宿主種類包括人、家山羊及鳥類;(5)貴州省分布的麻子繩蚋、雙齒蚋及1待定種為吸血蚋種。
【關(guān)鍵詞】:蚋科 病原體 宿主偏好 遺傳標(biāo)記 DNA條形碼 系統(tǒng)發(fā)育分析
【學(xué)位授予單位】:貴州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R384.5
【目錄】:
- 中文摘要4-6
- 英文摘要6-9
- 英文略縮詞表9-10
- 0 引言10-13
- 1 材料與方法13-25
- 2 結(jié)果25-42
- 3 討論42-44
- 4 結(jié)論44-45
- 參考文獻(xiàn)45-49
- 綜述49-59
- 參考文獻(xiàn)55-59
- 作者簡(jiǎn)歷59-60
- 致謝60-61
- 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集61
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1 楊明,畢光輝,陳漢彬;五條蚋和雙齒蚋nrDNA-ITS區(qū)序列分析(雙翅目:蚋科)[J];寄生蟲與醫(yī)學(xué)昆蟲學(xué)報(bào);2004年04期
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1 張圣芳;貴州省蚋類攜帶病原體和宿主種類的篩查[D];貴州醫(yī)科大學(xué);2016年
,本文編號(hào):636147
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