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FGF2對破骨細(xì)胞體外分化以及骨吸收功能的直接調(diào)控作用

發(fā)布時(shí)間:2017-08-07 07:21

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【摘要】:目的研究成纖維細(xì)胞生長因子2(fibroblast growth factor 2,FGF2)對于破骨細(xì)胞(osteoclast,OC)體外分化與功能的直接調(diào)控作用。方法分離野生型C3H/HeJ小鼠骨髓單核細(xì)胞,利用核因子κB受體活化因子配體(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)以及巨噬細(xì)胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,M-CSF)誘導(dǎo)向破骨細(xì)胞分化,同時(shí)在實(shí)驗(yàn)組中加入FGF2,觀察骨髓單核細(xì)胞向破骨細(xì)胞分化發(fā)育過程,鬼筆環(huán)肽(phalloidine)染色觀察破骨細(xì)胞肌動蛋白環(huán)(actin ring)變化,Real-time PCR檢測破骨細(xì)胞Trap、Mmp9、Ctsk以及Clcn7表達(dá),破骨細(xì)胞與骨片共培養(yǎng)檢測骨吸收功能變化,并用Western blot檢測相關(guān)信號通路分子表達(dá)情況。結(jié)果①TRAP染色顯示實(shí)驗(yàn)組與對照組破骨細(xì)胞數(shù)量無明顯差異(P0.05);②鬼筆環(huán)肽染色提示實(shí)驗(yàn)組與對照組肌動蛋白環(huán)均正常;③實(shí)驗(yàn)組Trap、Mmp9及Ctsk mRNA表達(dá)量均高于對照組(P0.05),而Clcn7 mRNA表達(dá)2組無明顯差異;④體外骨片吸收實(shí)驗(yàn)提示實(shí)驗(yàn)組骨吸收陷窩面積顯著大于對照組(P0.05);⑤Western blot檢測實(shí)驗(yàn)組磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK)較對照組表達(dá)明顯增多。結(jié)論 FGF2不影響破骨細(xì)胞前體細(xì)胞向破骨細(xì)胞的分化以及肌動蛋白環(huán)的形成,但可以通過ERK信號通路正向調(diào)控成熟破骨細(xì)胞的骨吸收功能。
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所創(chuàng)傷實(shí)驗(yàn)室 骨代謝與修復(fù)中心 創(chuàng)傷、燒傷與復(fù)合傷國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】破骨細(xì)胞 成纖維細(xì)胞生長因子 細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶
【基金】:國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(973計(jì)劃,2014CB942904) 國家自然科學(xué)基金(81270012,81170809) 國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室自主研究課題(SKLZZ201017)~~
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 破骨細(xì)胞是體內(nèi)行使骨吸收功能的最主要細(xì)胞,對于骨骼穩(wěn)態(tài)的維持發(fā)揮重要作用[1]。破骨細(xì)胞源于造血干細(xì)胞的單核/巨噬系,成熟破骨細(xì)胞通過附著于骨表面形成骨吸收陷窩,之后分泌H+以及各種溶解性酶類降解骨質(zhì)[2]。破骨細(xì)胞在分化發(fā)育過程中受到多種細(xì)胞因子的調(diào)控,其中最主要

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