本文關鍵詞：過表達肝細胞核因子4alpha對人骨髓間充質干細胞向肝樣細胞分化的作用

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【摘要】：目的應用轉基因技術將肝細胞核因子4alpha(HNF-4α)轉導入人骨髓間充質干細胞(MSCs)內,使其連續(xù)過表達HNF-4α并促進MSCs向肝樣細胞分化。方法 HNF-4α基因通過慢病毒表達載體pLV/Final-puro-hHNF4α-hrGFP轉入人MSCs(UE7T-13細胞)內,用流式細胞分析法檢測及分選后,收集hrGFP陽性的UE7T-13細胞進行擴增。體外成肝誘導一周后,免疫熒光染色檢測過表達HNF-4α基因的UE7T-13細胞(E7-hHNF-4α細胞)的白蛋白(ALB)和細胞角蛋白(CK18)的表達情況,糖原染色檢測UE7T-13細胞及E7-hHNF-4α細胞的糖原儲存功能。結果建立穩(wěn)定、過表達hHNF-4α基因的E7-hHNF-4α細胞,持續(xù)過表達HNF-4α促進MSCs向肝樣細胞分化,經(jīng)過7天體外成肝誘導,E7-hHNF-4α細胞具有成熟肝樣細胞表達ALB和CK18蛋白及糖原儲存功能。結論利用Gateway技術可將HNF-4α高效轉導入人MSCs細胞中,并有效促進MSCs向肝樣細胞分化。
【作者單位】： 中山大學附屬第三醫(yī)院放射科;
【關鍵詞】： 肝細胞核因子α 間質干細胞 細胞分化
【基金】：國家自然科學基金(81071206、81172193、81201090、81070349、81371655) NSFC-廣東聯(lián)合基金重點項目(U1032002) 衛(wèi)生部臨床學科重點項目(164)
【分類號】：R329
【正文快照】： 肝移植是目前唯一證實對肝硬化、肝衰竭等終末期肝臟疾病有效的臨床治療手段,但由于肝臟來源缺乏、免疫排斥等因素,使其在臨床上難以廣泛開展[1-2]。細胞移植可能改善患者肝功能,修復、重建受損的肝臟,在替代及過渡支持肝移植的治療中有一定的應用價值[3]。盡管目前大部分動物

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本文編號：632201