本文關(guān)鍵詞：過表達(dá)肝細(xì)胞核因子4alpha對人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向肝樣細(xì)胞分化的作用

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【摘要】：目的應(yīng)用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將肝細(xì)胞核因子4alpha(HNF-4α)轉(zhuǎn)導(dǎo)入人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)內(nèi),使其連續(xù)過表達(dá)HNF-4α并促進(jìn)MSCs向肝樣細(xì)胞分化。方法 HNF-4α基因通過慢病毒表達(dá)載體pLV/Final-puro-hHNF4α-hrGFP轉(zhuǎn)入人MSCs(UE7T-13細(xì)胞)內(nèi),用流式細(xì)胞分析法檢測及分選后,收集hrGFP陽性的UE7T-13細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增。體外成肝誘導(dǎo)一周后,免疫熒光染色檢測過表達(dá)HNF-4α基因的UE7T-13細(xì)胞(E7-hHNF-4α細(xì)胞)的白蛋白(ALB)和細(xì)胞角蛋白(CK18)的表達(dá)情況,糖原染色檢測UE7T-13細(xì)胞及E7-hHNF-4α細(xì)胞的糖原儲存功能。結(jié)果建立穩(wěn)定、過表達(dá)hHNF-4α基因的E7-hHNF-4α細(xì)胞,持續(xù)過表達(dá)HNF-4α促進(jìn)MSCs向肝樣細(xì)胞分化,經(jīng)過7天體外成肝誘導(dǎo),E7-hHNF-4α細(xì)胞具有成熟肝樣細(xì)胞表達(dá)ALB和CK18蛋白及糖原儲存功能。結(jié)論利用Gateway技術(shù)可將HNF-4α高效轉(zhuǎn)導(dǎo)入人MSCs細(xì)胞中,并有效促進(jìn)MSCs向肝樣細(xì)胞分化。
【作者單位】： 中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院放射科;
【關(guān)鍵詞】： 肝細(xì)胞核因子α 間質(zhì)干細(xì)胞 細(xì)胞分化
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81071206、81172193、81201090、81070349、81371655) NSFC-廣東聯(lián)合基金重點(diǎn)項(xiàng)目(U1032002) 衛(wèi)生部臨床學(xué)科重點(diǎn)項(xiàng)目(164)
【分類號】：R329
【正文快照】： 肝移植是目前唯一證實(shí)對肝硬化、肝衰竭等終末期肝臟疾病有效的臨床治療手段,但由于肝臟來源缺乏、免疫排斥等因素,使其在臨床上難以廣泛開展[1-2]。細(xì)胞移植可能改善患者肝功能,修復(fù)、重建受損的肝臟,在替代及過渡支持肝移植的治療中有一定的應(yīng)用價值[3]。盡管目前大部分動物

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本文編號：632201