本文關(guān)鍵詞：非基因整合建立人誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞方法的優(yōu)化研究

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【摘要】：誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞(iPSC)技術(shù)具有臨床應(yīng)用前景,但iPSC的遺傳穩(wěn)定性和成瘤性阻礙了其可能的臨床應(yīng)用。非整合質(zhì)粒(Episomal)方法無(wú)外源基因整合到宿主基因組上并且方法簡(jiǎn)單,適宜推廣,是目前保證iPSC遺傳安全性的最佳方案之一,但其誘導(dǎo)效率偏低,嚴(yán)重阻礙了其應(yīng)用。本研究旨在優(yōu)化Episomal方法,將臍血單個(gè)核細(xì)胞(CB MNC)重編程為誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞(iPSC),建立無(wú)基因整合的iPSC的高效生成技術(shù)體系,為以后建立疾病iPSC奠定基礎(chǔ)。利用CB MNC,通過(guò)比較不同氧含量,誘導(dǎo)質(zhì)粒,MNC培養(yǎng)方法和預(yù)刺激時(shí)間等條件對(duì)Episomal方法進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明:CB MNC采用紅系培養(yǎng)液,培養(yǎng)8 d,使用啟動(dòng)子為SFFV(spleen focus forming virus)的Episomal載體,在低氧(3%)條件下誘導(dǎo),CB MNC重編程效率最高,可達(dá)到0.12%。通過(guò)分析最佳條件下供體細(xì)胞成分發(fā)現(xiàn),表型為CD36+CD71+CD235alow的有核紅細(xì)胞是重編程最主要的供體細(xì)胞來(lái)源。結(jié)論:本研究成功建立并優(yōu)化出一種可推廣的高效安全的,可以用于臨床應(yīng)用研究的iPSC誘導(dǎo)技術(shù)。
【作者單位】： 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院、北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院血液病醫(yī)院、血液學(xué)研究所實(shí)驗(yàn)血液學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞 臍血 單個(gè)核細(xì)胞 Episomal載體 非整合
【基金】：科技部十二五支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2013BAI01B09) 科技部重大基礎(chǔ)研究項(xiàng)目(2013CB966902,2010CB945204) 國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81090410,81330015) 天津市科委基礎(chǔ)項(xiàng)目(11JCZDJC27900,13JCYBJC39400)
【分類(lèi)號(hào)】：R329.28
【正文快照】： 2006年,Yamanaka等[1]通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄病毒把外源基因?qū)氲叫∈蟮某衫w維細(xì)胞中,首次使之重編程為多能性干細(xì)胞(induced pluripotent stem cells,iPSC),2007年這項(xiàng)技術(shù)成功地將人的成纖維細(xì)胞重編程為iPSC[2-3]。體細(xì)胞重編程技術(shù)對(duì)再生醫(yī)學(xué)具有重大的意義,由患者自體細(xì)胞誘導(dǎo)的iPS

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 王婭婕;郝莎;袁衛(wèi)平;程濤;;誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞免疫原性的發(fā)生機(jī)制與干預(yù)對(duì)策[J];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào);2013年04期

2 張權(quán)娥;劉淑平;劉延風(fēng);張鴻雁;袁衛(wèi)平;陳桂彬;李彥欣;許靜;;非整合型質(zhì)粒重編程臍帶血CD34~+細(xì)胞形成誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞的研究[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2013年03期

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 杜勇;嚴(yán)緣昌;李逸平;;精原干細(xì)胞及其研究進(jìn)展[J];生殖與避孕;2011年08期

2 李麗娜;;控制人類(lèi)誘導(dǎo)多能干細(xì)胞多能性和決定早期細(xì)胞命運(yùn)的信號(hào)通路[J];中國(guó)病理生理雜志;2011年05期

3 王一陽(yáng);;Nanog穩(wěn)定胚胎干細(xì)胞的多能性以及調(diào)節(jié)生殖細(xì)胞的形成[J];中國(guó)病理生理雜志;2008年03期

4 李揚(yáng);林昌盛;王莉;劉英;牟曉寧;馬躍;李凌松;;明膠鋪底培養(yǎng)人胚胎干細(xì)胞的初步研究[J];科學(xué)通報(bào);2009年18期

5 華進(jìn)聯(lián),竇忠英,李松,屈雷;人胚胎干細(xì)胞研究進(jìn)展[J];中國(guó)科學(xué)基金;2000年02期

6 馮立新;陳向峰;;精原干細(xì)胞去分化和多能性的研究進(jìn)展[J];中華男科學(xué)雜志;2009年05期

7 ;維持干細(xì)胞多能性關(guān)鍵基因被發(fā)現(xiàn)[J];健康生活;2010年07期

8 ;干細(xì)胞讀本[J];中國(guó)燒傷創(chuàng)瘍雜志;2000年03期

9 山中伸彌;黃燕;;特定因子誘導(dǎo)多能干細(xì)胞[J];生命科學(xué);2010年03期

10 黃海霞,湯雪明;成體干細(xì)胞多能性研究進(jìn)展[J];生命科學(xué);2002年03期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 莊淑珍;董武子;竇忠英;;Nanog—維持ES細(xì)胞多能性的關(guān)鍵因子[A];全國(guó)首屆動(dòng)物生物技術(shù)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2004年

2 華進(jìn)聯(lián);劉雨瀟;董武子;竇忠英;;人類(lèi)羊水源類(lèi)ES細(xì)胞多能性干細(xì)胞的分離培養(yǎng)[A];全國(guó)首屆動(dòng)物生物技術(shù)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2004年

3 賀晨;;干細(xì)胞研究近況[A];2005年浙江省醫(yī)學(xué)病毒學(xué)、醫(yī)學(xué)微生物與免疫學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2005年

4 江儒章;葛堅(jiān);黃冰;宋革;孫雪榮;張躍紅;何媛;;異種嵌合體模型研究恒河猴表皮干細(xì)胞分化多能性[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二屆全國(guó)眼科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2007年

5 房佰俊;宋永平;張莉;魏旭東;胡杰英;趙春華;;臍帶源間充質(zhì)干細(xì)胞分離純化及其生物學(xué)特性的初步研究[A];第10屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要匯編[C];2005年

6 范力星;冀凱宏;熊俊;胡凱猛;劉厚奇;;骨髓源性多能干細(xì)胞(MMSC)向多巴胺能神經(jīng)元的體外分化[A];中國(guó)解剖學(xué)會(huì)第十一屆全國(guó)組織學(xué)與胚胎學(xué)青年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2009年

7 周琪;;多能性細(xì)胞研究及其在再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用進(jìn)展[A];第九屆中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)年會(huì)（2010新疆）論文集[C];2010年

8 曾輝;Jung Woo Park;郭敏;徐仁和;陳方平;;ABCG2缺失是人多能干細(xì)胞的一個(gè)新的顯著特征[A];第12屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

9 秦潔;張艷敏;郭新;漆正宇;蔡志明;桂耀庭;;EZH2在iPS細(xì)胞向PGC分化進(jìn)程中的表觀調(diào)控機(jī)制[A];2011中國(guó)（威海）干細(xì)胞與組織工程治療前沿論壇論文集[C];2011年

10 鄒立津;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外自發(fā)惡性轉(zhuǎn)化[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)燒傷外科學(xué)分會(huì)2009年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 記者 王丹;維持干細(xì)胞多能性關(guān)鍵基因被發(fā)現(xiàn)[N];健康報(bào);2010年

2 本報(bào)記者 馮衛(wèi)東;向左分裂向右分化[N];科技日?qǐng)?bào);2009年

3 記者 馮衛(wèi)東;睪丸干細(xì)胞僅具備多能細(xì)胞部分特性[N];科技日?qǐng)?bào);2009年

4 常麗君;新方法能控制干細(xì)胞按需分化[N];科技日?qǐng)?bào);2011年

5 毛磊；顏亮;打開(kāi)治療性克隆應(yīng)用的大門(mén)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2004年

6 陳列歡;造血干細(xì)胞 能分化成神經(jīng)干細(xì)胞？[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2003年

7 黎彬;可維持干細(xì)胞增殖能力的蛋白[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2003年

8 馮衛(wèi)東;科學(xué)家分離出人類(lèi)胚胎中胚層祖細(xì)胞[N];科技日?qǐng)?bào);2010年

9 毛磊;人類(lèi)胚胎干細(xì)胞首次克隆成功[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2004年

10 劉霞;制造誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞再現(xiàn)新方法[N];科技日?qǐng)?bào);2011年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 顧奇;多能性干細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境和多能性的相關(guān)研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

2 趙明濤;豬皮膚來(lái)源前體細(xì)胞多能性的分子機(jī)制[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2010年

3 胡挺松;生殖干細(xì)胞與腫瘤干細(xì)胞多能性及分裂機(jī)制的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2009年

4 杜麗麗;十二種疾病特異的iPS系和血小板無(wú)力iPS疾病模型的建立以及hESCs胞質(zhì)中重編程相關(guān)因子的檢測(cè)[D];中南大學(xué);2012年

5 吳蓉蓉;人胚胎干細(xì)胞建系，鑒定及分化為多能性間充質(zhì)樣前體細(xì)胞[D];浙江大學(xué);2009年

6 許丹;胚胎干細(xì)胞參與形成的融合細(xì)胞對(duì)損傷肝細(xì)胞作用的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

7 劉娜;Nanog在胚胎干細(xì)胞自我更新中的作用機(jī)制研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

8 許杰;小鼠iPS細(xì)胞的誘導(dǎo)以及白血病抑制因子在細(xì)胞重編程過(guò)程中的作用機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2010年

9 張文成;細(xì)胞重編程與誘導(dǎo)內(nèi)胚層多能干細(xì)胞的獲取與鑒定[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2012年

10 曲鑫建;多順?lè)醋淤|(zhì)粒載體重編程脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞[D];大連理工大學(xué);2013年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 趙小玉;小鼠誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞傳代培養(yǎng)中染色體不穩(wěn)定的研究[D];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);2011年

2 黃偉;小鼠MSCs多能性及其與顆粒細(xì)胞相互影響的研究[D];暨南大學(xué);2011年

3 許震宇;組蛋白修飾因子CARM1調(diào)控人胚胎干細(xì)胞多能性分子機(jī)制的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2012年

4 董迪飛;穩(wěn)定表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子FoxA1或FoxM1對(duì)干細(xì)胞多能性及其分化潛能影響的研究[D];湖南大學(xué);2011年

5 凌占業(yè);人與獼猴不同組織多能性干細(xì)胞相關(guān)基因和標(biāo)志抗原的表達(dá)分析[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

6 彭敏鋒;小鼠Oct4基因的克隆及其真核表達(dá)載體的構(gòu)建[D];南昌大學(xué);2008年

7 何斯佳;轉(zhuǎn)錄輔助抑制因子Grg3參與干細(xì)胞多能性基因OCT4轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)理初探[D];湖南大學(xué);2012年

8 林長(zhǎng)貴;慢病毒載體介導(dǎo)nanog基因修飾小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞[D];福建醫(yī)科大學(xué);2008年

9 李宏宇;不同來(lái)源體細(xì)胞誘導(dǎo)形成多能性干細(xì)胞（iPS）的比較研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2012年

10 陳曉芳;匯合依賴(lài)型體細(xì)胞重編程模型及其初步驗(yàn)證[D];山東大學(xué);2012年

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本文編號(hào)：629905