腸三葉因子對(duì)胃黏膜上皮細(xì)胞增殖的影響及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的研究
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【摘要】:目的腸三葉因子(intestinal trefoil factor,ITF)對(duì)胃黏膜具有保護(hù)作用,但其機(jī)制尚不明確。文中探討重組ITF對(duì)胃黏膜上皮細(xì)胞增殖能力的影響及其可能作用的分子機(jī)制。方法將體外培養(yǎng)的GES-1細(xì)胞分為3組,其中1組作為細(xì)胞增殖活力實(shí)驗(yàn)空白對(duì)照組,其他2組分別加入濃度為100和500 ng/m L的人重組ITF形成低濃度ITF組和高濃度ITF組。光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),并采用CCK-8試劑盒檢測GES-1細(xì)胞的增殖活力。體外培養(yǎng)的GES-1細(xì)胞株分別用100 ng/m L的ITF和濃度為15μmol/L的PI3K/Akt信號(hào)通路抑制劑LY294002進(jìn)行處理,分為信號(hào)通路蛋白表達(dá)實(shí)驗(yàn)空白對(duì)照組、ITF組、LY294002組和ITF+LY294002組,光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)。隨后采用CCK-8試劑盒檢測GES-1細(xì)胞處理后的增殖活力,采用Western blot檢測PI3K/Akt信號(hào)通路中p-Akt和Akt蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果與空白對(duì)照組相比,ITF刺激下GES-1細(xì)胞增殖活力明顯增強(qiáng),且ITF濃度越高、增殖活力越強(qiáng)。使用LY294002處理后,能夠顯著抑制ITF刺激的細(xì)胞增殖。Western blot檢測結(jié)果表明,ITF提高了p-Akt蛋白的表達(dá)水平,激活PI3K/Akt信號(hào)通路。結(jié)論 ITF促進(jìn)GES-1細(xì)胞的增殖,推測其分子作用機(jī)制主要是通過激活PI3K/Akt信號(hào)通路促進(jìn)細(xì)胞增殖。
【作者單位】: 南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬金陵醫(yī)院(南京軍區(qū)南京總醫(yī)院)急救醫(yī)學(xué)科;
【關(guān)鍵詞】: GES-細(xì)胞 腸三葉因子 增殖 調(diào)控 PIK/Akt信號(hào)通路
【基金】:南京軍區(qū)醫(yī)藥衛(wèi)生科研基金(12Z32) 南京軍區(qū)南京總醫(yī)院科研基金(2014004)
【分類號(hào)】:R363
【正文快照】: 0引言腸三葉因子(intestinal trefoil factor,ITF)屬于三葉肽家族(trefoil factor family,TFF),是一種小分子多肽物質(zhì),主要在小腸及結(jié)腸杯狀細(xì)胞、胃竇黏膜中表達(dá),具有重要的胃腸道黏膜保護(hù)和修復(fù)作用[1-5]。ITF具有較強(qiáng)的細(xì)胞保護(hù)作用,可促進(jìn)胃腸道黏膜上皮細(xì)胞增殖遷移,減輕
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,本文編號(hào):624272
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