本文關(guān)鍵詞：磁珠法DNA提取技術(shù)在多重連接依賴探針擴(kuò)增檢測中的應(yīng)用

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【摘要】：目的探討磁珠法DNA提取技術(shù)在多重連接依賴探針擴(kuò)增(MLPA)檢測樣品制備中的應(yīng)用價值。方法分別用半自動磁珠法和手工離心柱法提取1例21-羥化酶缺乏癥患者和16例健康男性外周血、16例羊水細(xì)胞標(biāo)本的基因組DNA,用MLPA法檢測CYP21A2基因拷貝數(shù),比較兩種方法制備DNA的質(zhì)量及MLPA結(jié)果。用磁珠法提取200例羊水細(xì)胞DNA,MLPA法檢測染色體非整倍體異常表達(dá)情況。結(jié)果磁珠法提取外周血DNA的濃度和總量均高于離心柱法(P0.05)。兩種方法提取羊水DNA濃度相當(dāng),磁珠法所得總量較高(P0.05)。21-羥化酶缺乏癥患者CYP21A2基因拷貝數(shù)比值接近0.5。200例羊水標(biāo)本中檢出正常二倍體188例,21三體9例,18三體2例,特納(Turner)綜合征(45,X)1例,與核型分析結(jié)果一致。結(jié)論磁珠法制備的外周血和羊水細(xì)胞DNA適用于MLPA檢測,具有較高的應(yīng)用價值。
【作者單位】： 南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京婦幼保健院產(chǎn)前診斷中心;
【關(guān)鍵詞】： 磁珠法 DNA提取 多重連接依賴探針擴(kuò)增技術(shù)
【基金】：江蘇省醫(yī)學(xué)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)與領(lǐng)軍人才課題(LJ201109) 江蘇省臨床醫(yī)學(xué)科技專項(xiàng)(BL2012039) 江蘇省婦幼保健科研項(xiàng)目(F201206) 南京市科技發(fā)展計劃項(xiàng)目(201201064) 南京市衛(wèi)生局科技發(fā)展項(xiàng)目(YKK11059)
【分類號】：R346
【正文快照】： 多重連接依賴探針擴(kuò)增技術(shù)(multiplex ligation-dependent probe amplication,MLPA)最早由Schouten等[1]研發(fā),該技術(shù)利用少量DNA,一次反應(yīng)可對40多個靶序列進(jìn)行定量分析。目前MLPA檢測主要用離心柱法[2]和酚-氯法[3]提取基因組DNA,國內(nèi)尚未見半自動化DNA提取法在MLPA檢測中的

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本文編號：619126