發(fā)布時間：2017-08-03 18:38

  本文關鍵詞：腸出血性大腸桿菌O157∶H7毒力蛋白NleB1的表達、純化及多克隆抗體的制備與鑒定

  更多相關文章： 腸出血性大腸桿菌 NleB 原核表達 蛋白純化 多克隆抗體

【摘要】：目的構建腸出血性大腸桿菌(EHEC)O157∶H7毒力蛋白nleB1基因的原核表達載體,誘導表達重組蛋白,制備NleB1的抗血清。方法從EHEC O157∶H7 EDL933株的全基因組中PCR擴增出編碼nleB1的990個堿基序列,構建原核表達載體pET24a-nleB1,將構建的重組表達載體的質粒pET24a-nleB1轉化至大腸桿菌BL21(DE3)感受態(tài)細胞中,利用異丙硫半乳糖苷(IPTG)誘導融合蛋白His-NleB1表達,并利用鎳柱進行親和層析純化和切膠純化,以純化后的融合蛋白His-NleB1為抗原免疫BALB/c小鼠,獲得抗血清。Western印跡和ELISA法鑒定獲得的抗血清。結果成功構建了pET24a-nleB1原核表達載體,純化得到融合蛋白His-NleB1,進而免疫BALB/c小鼠制備多克隆抗體,Western印跡和ELISA法證實多克隆抗體制備成功。結論成功獲得了EHEC O157∶H7的毒力蛋白NleB1的多克隆抗體,為研究EHEC O157∶H7毒力蛋白NleB1的功能奠定了基礎。
【作者單位】： 軍事醫(yī)學科學院生物工程研究所;安徽大學;
【關鍵詞】： 腸出血性大腸桿菌 NleB 原核表達 蛋白純化 多克隆抗體
【分類號】：R378.21
【正文快照】： 腸出血性大腸桿菌(enterohemorrhagic Esche-richia coli,EHEC)O157∶H7是一種危害嚴重的腸道致病菌,該菌可使人患腹瀉、出血性結腸炎(hemor-rhagic colitis,HC)、溶血性尿毒綜合征(hemolyticuremic syndrome,HUS)及血栓形成性血小板減少性紫癜(thrombotic thrombocytopenic p

【共引文獻】

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本文編號：615799