發(fā)布時(shí)間：2017-07-30 21:00

  本文關(guān)鍵詞：腺病毒、呼吸道合胞病毒和博卡病毒三重?zé)晒釸T-PCR快速檢測的研究分析

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【摘要】：目的利用熒光定量RT-PCR技術(shù)建立一種快速檢測腺病毒、合胞病毒和博卡病毒的方法。方法從Gen Bank隨機(jī)下載腺病毒、合胞病毒和博卡病毒的目的基因,通過MEGA分析,利用Primer Express3.0軟件設(shè)計(jì)三對引物及其相應(yīng)的Taqman探針,利用一步法RT-PCR來建立和優(yōu)化反應(yīng)體系。10倍稀釋陽性對照,來檢驗(yàn)建立體系的靈敏度和重復(fù)性。利用具有相似臨床癥狀的呼吸道病毒檢驗(yàn)建立體系的特異性。結(jié)果建立了一個(gè)單管對腺病毒、呼吸道合胞病毒和博卡病毒進(jìn)行檢測的三重?zé)晒釸T-PCR反應(yīng)體系。該體系的檢測靈敏度為102 copies/μl,擴(kuò)增效率分別為92.24%、96.95%和99.70%,標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)大于99%,重復(fù)性變異系數(shù)3.5%,特異性實(shí)驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)有非特異性擴(kuò)增。結(jié)論建立的三重?zé)晒饪梢钥焖�、�?zhǔn)確地檢測腺病毒、合胞病毒和博卡病毒。
【作者單位】： 廣東省深圳市疾病預(yù)防控制中心 深圳市科技創(chuàng)新委重大傳染病監(jiān)控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 深圳市病原微生物資源庫建立與應(yīng)用公共服務(wù)平臺(tái);廣東省深圳市疾病預(yù)防控制中心 深圳市科技創(chuàng)新委重大傳染病監(jiān)控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn) 室深圳市病原微生物資源庫建立與應(yīng)用公共服務(wù)平臺(tái);
【關(guān)鍵詞】： 腺病毒 呼吸道合胞病毒 博卡病毒 三重?zé)晒釸T-PCR
【基金】：深圳市科技計(jì)劃項(xiàng)目(201202089) 廣東省部產(chǎn)學(xué)研項(xiàng)目(2012B091100105)
【分類號(hào)】：R373.1
【正文快照】： 腺病毒(adenovirus,HAV)是一種沒有包膜的DNA病毒,基因組長約25~45 kb,1956年由科學(xué)家Morris在患有感冒的黑猩猩的鼻分泌中發(fā)現(xiàn)[1]。呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,HRSV)是一種RNA病毒,在1953年被發(fā)現(xiàn),屬于副黏病毒科,主要有A和B兩個(gè)亞型[2]。博卡病毒(bocaviru

【參考文獻(xiàn)】

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2 何瑰;程春燕;陳娟;;呼吸道合胞病毒實(shí)時(shí)熒光RT-PCR定量檢測方法的建立[J];分子診斷與治療雜志;2009年03期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

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3 鄭文芝;張騫;魏建民;薛鵬浩;王翔;趙智慧;鄭麗舒;;呼吸道合胞病毒TaqMan探針實(shí)時(shí)定量RT-PCR檢測方法的建立及應(yīng)用[J];生物技術(shù)通訊;2012年02期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 張菲;多重實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測人博卡病毒的價(jià)值[D];南華大學(xué);2012年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 何瑰;程春燕;;呼吸道合胞病毒及其基因檢測[J];分子診斷與治療雜志;2009年01期

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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7 何慧;劉新;;新發(fā)現(xiàn)的呼吸道感染病原——人博卡病毒[J];醫(yī)學(xué)綜述;2008年21期

8 錢淵;;人博卡病毒研究進(jìn)展[J];中國實(shí)用兒科雜志;2009年01期

9 周建林;伍嚴(yán)安;;人博卡病毒的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2009年12期

10 鄒麗容;鄭夔;周杰;莫艷玲;方苓;陳秋霞;李暉;柯昌文;;熒光定量PCR方法快速檢測人博卡病毒的研究[J];華南預(yù)防醫(yī)學(xué);2009年06期

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5 王婷;李昌崇;陳小芳;聶穎;崇蕾;;溫州地區(qū)人博卡病毒在急性喘息患兒中的檢測及其病毒載量與疾病嚴(yán)重程度的相關(guān)分析[A];2012年江浙滬兒科學(xué)術(shù)年會(huì)暨浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)分會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)、兒內(nèi)科疾病診治新進(jìn)展國家級(jí)學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2012年

6 林峰;;人博卡病毒感染支氣管上皮細(xì)胞的生物學(xué)特征研究[A];2008年浙江省兒科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

7 王婷;李昌崇;陳小芳;聶穎;崇蕾;;溫州地區(qū)人博卡病毒在急性喘息患兒中的檢出及其病毒載量與疾病嚴(yán)重程度的相關(guān)分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十三屆全國兒科呼吸學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2012年

8 李芳;孫玉寧;張茜;蘆曉紅;;博卡病毒MVC在不同種屬細(xì)胞系病毒基因組復(fù)制及感染特性分析[A];中國的遺傳學(xué)研究——遺傳學(xué)進(jìn)步推動(dòng)中國西部經(jīng)濟(jì)與社會(huì)發(fā)展——2011年中國遺傳學(xué)會(huì)大會(huì)論文摘要匯編[C];2011年

9 何彪;楊凡力;涂長春;;中國蝙蝠病毒宏基因組學(xué)研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)獸醫(yī)公共衛(wèi)生學(xué)分會(huì)第三次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2012年

10 王維;林書祥;黃敬孚;徐曉華;;天津地區(qū)嬰幼兒腹瀉博卡病毒的檢出及鑒定[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十七次全國兒科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編（上冊）[C];2012年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 記者　 鄧明 通訊員　 白培生 劉巧突;郴州在國內(nèi)首次發(fā)現(xiàn)人類博卡病毒[N];湖南日報(bào);2006年

2 記者 吳德群;口岸連查4宗 人感染博卡病毒[N];深圳特區(qū)報(bào);2012年

3 陳茂j 趙斌;溫嶺市一院在我國首次發(fā)現(xiàn)人博卡病毒[N];中國醫(yī)藥報(bào);2006年

4 記者 王理略 通訊員 任麗瓊;首次克隆出人博卡病毒全基因組[N];湖北日報(bào);2014年

5 貴州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院 郝飛 湯德元;豬博卡病毒研究進(jìn)展[N];河北科技報(bào);2012年

6 記者　 龍軍;我國首次發(fā)現(xiàn)人類博卡病毒HBoV[N];光明日報(bào);2006年

7 洪衛(wèi) 張敏;迎接照耀醫(yī)學(xué)高峰的新曙光[N];浙江日報(bào);2006年

8 何彪 沈基飛;我學(xué)者發(fā)現(xiàn)新型SARS樣冠狀病毒[N];健康報(bào);2014年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 程衛(wèi)霞;博卡病毒流行病學(xué)、致病性及基因進(jìn)化研究[D];蘭州大學(xué);2011年

2 趙慧;兒童腹瀉相關(guān)的人博卡病毒2型的初步研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

3 李京京;人類博卡病毒HBoV1基因組克隆及轉(zhuǎn)錄、翻譯分子機(jī)制研究[D];華中師范大學(xué);2012年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馬均;兒童急性呼吸道感染人博卡病毒檢測及分析[D];吉林大學(xué);2009年

2 梁丹丹;小兒呼吸道人類博卡病毒感染免疫致病機(jī)制的初步研究[D];汕頭大學(xué);2011年

3 漆正宇;我國人博卡病毒的分子流行病學(xué)及衣殼蛋白獨(dú)有區(qū)表達(dá)純化的研究[D];貴州大學(xué);2007年

4 韓虎;人博卡病毒結(jié)構(gòu)蛋白與非結(jié)構(gòu)蛋白功能的初步研究[D];華中師范大學(xué);2012年

5 李紅學(xué);人博卡病毒在健康獻(xiàn)漿人群中的基因組和血清學(xué)抗體流行情況研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

6 周瓊?cè)A;人博卡病毒在急性下呼吸道感染住院兒童中的現(xiàn)狀分析[D];湖南師范大學(xué);2011年

7 丁媛;重慶地區(qū)兒童呼吸道博卡病毒感染特點(diǎn)[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2007年

8 張宏彪;豬博卡病毒在我國部分地區(qū)的分子流行病學(xué)調(diào)查及其熒光定量PCR方法的建立與應(yīng)用[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

9 李玲;不同檢測方法在兒童急性下呼吸道人博卡病毒感染診斷中的應(yīng)用[D];蘇州大學(xué);2014年

10 王美娟;人博卡病毒在蘇州地區(qū)兒童急性呼吸道感染中的地位[D];蘇州大學(xué);2010年

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本文編號(hào)：596018