本文關(guān)鍵詞：腺病毒、呼吸道合胞病毒和博卡病毒三重熒光RT-PCR快速檢測的研究分析

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【摘要】：目的利用熒光定量RT-PCR技術(shù)建立一種快速檢測腺病毒、合胞病毒和博卡病毒的方法。方法從Gen Bank隨機下載腺病毒、合胞病毒和博卡病毒的目的基因,通過MEGA分析,利用Primer Express3.0軟件設(shè)計三對引物及其相應(yīng)的Taqman探針,利用一步法RT-PCR來建立和優(yōu)化反應(yīng)體系。10倍稀釋陽性對照,來檢驗建立體系的靈敏度和重復性。利用具有相似臨床癥狀的呼吸道病毒檢驗建立體系的特異性。結(jié)果建立了一個單管對腺病毒、呼吸道合胞病毒和博卡病毒進行檢測的三重熒光RT-PCR反應(yīng)體系。該體系的檢測靈敏度為102 copies/μl,擴增效率分別為92.24%、96.95%和99.70%,標準曲線的相關(guān)系數(shù)大于99%,重復性變異系數(shù)3.5%,特異性實驗未發(fā)現(xiàn)有非特異性擴增。結(jié)論建立的三重熒光可以快速、準確地檢測腺病毒、合胞病毒和博卡病毒。
【作者單位】： 廣東省深圳市疾病預防控制中心 深圳市科技創(chuàng)新委重大傳染病監(jiān)控重點實驗室 深圳市病原微生物資源庫建立與應(yīng)用公共服務(wù)平臺;廣東省深圳市疾病預防控制中心 深圳市科技創(chuàng)新委重大傳染病監(jiān)控重點實驗 室深圳市病原微生物資源庫建立與應(yīng)用公共服務(wù)平臺;
【關(guān)鍵詞】： 腺病毒 呼吸道合胞病毒 博卡病毒 三重熒光RT-PCR
【基金】：深圳市科技計劃項目(201202089) 廣東省部產(chǎn)學研項目(2012B091100105)
【分類號】：R373.1
【正文快照】： 腺病毒(adenovirus,HAV)是一種沒有包膜的DNA病毒,基因組長約25~45 kb,1956年由科學家Morris在患有感冒的黑猩猩的鼻分泌中發(fā)現(xiàn)[1]。呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,HRSV)是一種RNA病毒,在1953年被發(fā)現(xiàn),屬于副黏病毒科,主要有A和B兩個亞型[2]。博卡病毒(bocaviru

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本文編號：596018