大鼠來源滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞的成軟骨分化
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【摘要】:背景:相比其他組織來源的間充質(zhì)干細(xì)胞,滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞有著較強(qiáng)的成軟骨特性和克隆能力,因此將是軟骨組織工程中最有前景的種子細(xì)胞之一。目的:培養(yǎng)及體外擴(kuò)增SD大鼠滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞,鑒定其多向分化潛能及在添加生長因子后三維立體培養(yǎng)條件下的成軟骨能力。方法:無菌條件下獲取SD大鼠滑膜組織,Ⅰ型膠原酶消化法分離大鼠滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞。體外擴(kuò)增、培養(yǎng),取第3代滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行吉姆薩、生長曲線測定、成脂誘導(dǎo)、成骨誘導(dǎo)和三維條件下成軟骨誘導(dǎo),成軟骨誘導(dǎo)21 d后通過甲苯胺藍(lán)染色、Ⅱ型膠原免疫組化染色及RT-PCR對成軟骨誘導(dǎo)后產(chǎn)物進(jìn)行檢測。結(jié)果與結(jié)論:獲取的大鼠滑膜細(xì)胞具有間充質(zhì)干細(xì)胞的特性,滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞在體外培養(yǎng)呈成纖維樣形態(tài),并維持著多向分化的能力。使用生長因子誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞21 d后,可見軟骨樣組織,蛋白聚糖和Ⅱ型膠原可以在甲苯胺藍(lán)染色和Ⅱ型膠原免疫組化染色后被檢測到。RT-PCR檢測結(jié)果顯示軟骨誘導(dǎo)分化后細(xì)胞中Ⅱ型膠原和蛋白聚糖mRNA呈陽性表達(dá)。提示大鼠來源的滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞具有成軟骨能力。
【作者單位】: 新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院頜面腫瘤外科;新疆醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院 新疆維吾爾自治區(qū)口腔醫(yī)學(xué)研究所;
【關(guān)鍵詞】: 干細(xì)胞 間質(zhì)干細(xì)胞 膠原Ⅱ型 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng) 組織構(gòu)建 軟骨組織工程 分化 滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞 成骨 成脂 成軟骨 生長因子 三維培養(yǎng) 國家自然科學(xué)基金
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31260229),項(xiàng)目名稱:PLLA/PDLA三維支架與滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞/軟骨細(xì)胞構(gòu)建顳下頜關(guān)節(jié)盤的研究~~
【分類號】:R329
【正文快照】: 0引言Introduction成熟的軟骨有很低的自我修復(fù)能力,歸因于其內(nèi)在性質(zhì)-缺乏神經(jīng)分布和血管供應(yīng),并且軟骨細(xì)胞緊密的包繞于膠原-蛋白多糖基質(zhì)中,從而限制了軟骨細(xì)胞的遷移和增殖。小的缺損可以通過軟骨細(xì)胞移植恢復(fù),大的缺損可以通過下層纖維軟骨恢復(fù)[1]。已有研究表明,當(dāng)軟骨
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本文編號:590235
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