發(fā)布時間：2017-07-28 13:38

  本文關鍵詞：腸道病毒71型滅活疫苗的小鼠細胞免疫效果

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【摘要】：目的評價腸道病毒71型(enterovirus 71,EV71)滅活疫苗誘導小鼠的細胞免疫效果。方法分別以不同劑量(1、2.5、5、10μg/ml,均含鋁佐劑1 mg/ml)、不同劑型(含鋁佐劑1 mg/ml或不含鋁佐劑)、不同免疫劑次(單次免疫或加強免疫)EV71滅活疫苗經腹腔免疫小鼠,0.5 ml/只,均設鋁佐劑對照組(僅注射鋁佐劑1 mg/ml)。采用經典小鼠樹突狀細胞(dendritic cell,DC)培養(yǎng)方法制備正常小鼠DC,瑞氏染色法檢測細胞形態(tài),流式細胞術分析其表型及純度;免疫磁珠分選法(magnetic activated cell sorting,MACS)分離小鼠脾臟CD4+、CD8+T淋巴細胞,流式細胞術檢測細胞純度。ELISPOT法檢測各組免疫小鼠CD4+、CD8+T淋巴細胞分泌IL-2、IL-4、IFNγ的水平;細胞因子試劑盒檢測小鼠淋巴細胞培養(yǎng)上清及小鼠血清中細胞因子的水平。結果 DC形態(tài)不規(guī)則,表面樹枝狀突起形態(tài)不同,細胞核較大且不規(guī)則;DC純度為(81.39±9.24)%,可高水平表達MHⅡ(I-A/I-E)類分子,中度表達CD86和CD40。CD4+、CD8+T細胞純度分別為95.27%和94.08%。隨著疫苗免疫劑量的增加,CD4+T細胞分泌IL-2、IL-4、IFNγ及CD8+T細胞分泌IFNγ的SFC顯著增加,5μg/ml疫苗組達最大值,且明顯高于其他組(P均0.05);5μg/ml疫苗組淋巴細胞培養(yǎng)上清中IFNγ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL-5、TNF-α含量明顯高于其他組(P0.05);1、2.5、5μg/ml疫苗組血清中IL-10含量明顯高于鋁佐劑對照組(P0.05),1μg/ml疫苗組明顯低于2.5及5μg/ml疫苗組(P0.05)。含鋁佐劑疫苗組CD4+T細胞分泌IL-2、IL-4、IFNγ及CD8+T細胞分泌IFNγ的SFC、淋巴細胞培養(yǎng)上清中IL-2、IFNγ、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-13、TNF-α水平及血清中IL-10含量均明顯高于無鋁佐劑疫苗組(P均0.05)。加強免疫組CD4+T細胞分泌IL-2、IL-4、IFNγ及CD8+T細胞分泌IFNγ的SFC、淋巴細胞培養(yǎng)上清中IL-2、IFNγ、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-13、TNF-α水平、血清中IL-10含量均明顯高于單次免疫組(P均0.05)。結論 EV71滅活疫苗可誘導小鼠產生特異性細胞免疫反應,本實驗為其進一步人體臨床試驗研究奠定了基礎。
【作者單位】： 北京生物制品研究所有限責任公司第二研究室;
【關鍵詞】： 腸道病毒型 滅活疫苗 細胞免疫
【基金】：國家重大新藥創(chuàng)制項目(2011ZX2009401-403-11) 863計劃項目(2012AA02A401) 重大新藥創(chuàng)制項目(2012ZX09101319)
【分類號】：R373.24
【正文快照】： 手足口病(hand foot mouth disease,HFMD)的主要病原體為腸道病毒71型(enterovirus 71,EV71),該病臨床癥狀主要為發(fā)熱、手、足等部位出現(xiàn)皮疹及口腔潰瘍等,少數(shù)EV71感染患者可引起中樞神經系統(tǒng)疾病[1-2],包括病毒性腦膜炎、腦炎、類似小兒麻痹的癱瘓,隨后出現(xiàn)肺水腫、肺出血等

【共引文獻】

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 謝新星;不同腸道病毒感染致242例重型手足口臨床特點分析[D];遵義醫(yī)學院;2013年

2 王冠洲;EV71感染宿主中樞神經系統(tǒng)過程中宿主因子作用的初步探究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2013年

3 劉雪;EV71感染患兒細胞免疫功能和外周血單個核細胞Toll樣受體的變化及臨床意義[D];第四軍醫(yī)大學;2013年

4 馬娜;EV71對星形膠質細胞的感染及其病理意義的研究[D];昆明醫(yī)科大學;2013年

5 劉春虹;中樞神經系統(tǒng)感染與腦脊液IFN-γ、CRP、NSE的研究[D];寧夏醫(yī)科大學;2013年

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 Q萌示，

本文編號：584350