Frizzled4在小鼠毛囊周期中的表達(dá)
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【摘要】:目的探討Wnt蛋白的受體分子Frizzled4在小鼠毛囊周期中的表達(dá)、功能及其意義。方法利用實(shí)時(shí)定量PCR、RT-PCR、Western blot和免疫熒光等技術(shù)分別檢測Frizzled4 mRNA和蛋白在毛囊生長期(P1d、P3d、P8d)、退化期(P16d)和靜止期(P21d)中的表達(dá)。免疫熒光技術(shù)檢測Frizzled4在小鼠皮膚上皮細(xì)胞JB6 cl30-7b中的定位,MTT檢測用抗Frizzled4抗體處理JB6 cl30-7b細(xì)胞后的增殖情況。結(jié)果在毛囊生長期早期,Frizzled4 mRNA和蛋白在P1d的小鼠背部皮膚中表達(dá)明顯,膜表達(dá)于Bulge、毛囊外根鞘及毛球外側(cè)。在P3d,Frizzled4蛋白表達(dá)明顯上調(diào),主要表達(dá)于Bulge、毛囊外根鞘、內(nèi)根鞘、precortex、部分毛球外側(cè)。在生長中期(P8d),Frizzled4蛋白的表達(dá)最強(qiáng),集中在毛囊Bulge、外根鞘上段及內(nèi)根鞘。當(dāng)毛囊進(jìn)入退化期(P16d),Frizzled4 mRNA和蛋白的表達(dá)顯著降低(P0.05),此時(shí)主要定位于Bugle。而在靜止期,Frizzled4 mRNA和蛋白表達(dá)最低(P0.05),只有少量Frizzled4陽性細(xì)胞出現(xiàn)在毛囊Bulge。免疫熒光技術(shù)檢測Frizzled4蛋白同樣也在JB6 cl30-7b細(xì)胞膜中表達(dá)。MTT結(jié)果顯示與對(duì)照組相比,10μg/mL的抗Frizzled4抗體處理JB6cl30-7b細(xì)胞后光密度值明顯降低(P0.05),而20μg/mL的抗Frizzled4抗體處理后的光密度值降到最低(P0.05)。結(jié)論 Frizzled4在毛囊周期中的表達(dá)具有時(shí)空特異性。伴隨著毛囊的生長,Frizzled4的mRNA和蛋白水平都呈現(xiàn)高表達(dá),隨著毛囊的退化而表達(dá)降低,直至靜止期維持低表達(dá)水平。拮抗Frizzled4蛋白的作用促使細(xì)胞增殖受到明顯抑制,提示Frizzled4的表達(dá)與毛囊細(xì)胞的增殖和分化相關(guān)。
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所皮膚科;
【關(guān)鍵詞】: Frizzled 毛囊 小鼠 Wnt 抗體
【基金】:國家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863計(jì)劃,2012AA020504-4) 國家自然科學(xué)基金(30070701)~~
【分類號(hào)】:R322.99;Q78
【正文快照】: 毛囊是皮膚重要的附屬器官,生產(chǎn)毛發(fā),發(fā)揮著保暖、感覺、吸引異性等重要作用。毛囊周期性的生長、退化和靜止引起毛發(fā)的生長和退化。而毛囊異常與脫發(fā)、多毛癥甚至腫瘤的發(fā)生相關(guān)[1-3]。因而對(duì)毛囊生長調(diào)控的研究具有很重要的科學(xué)意義。Wnt信號(hào)是調(diào)控毛囊周期最重要的信號(hào)之一
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4 周s
本文編號(hào):580964
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