本文關(guān)鍵詞：人氣道上皮細(xì)胞感知冷刺激的受體機(jī)制

  更多相關(guān)文章： 氣道上皮細(xì)胞 冷刺激 瞬時(shí)受體電位蛋白- Ca+ PIP

【摘要】：目的探討溫度感受器瞬時(shí)受體電位蛋白-8(transient receptor potential melastatin 8,TRPM8)在人氣道上皮細(xì)胞感受冷刺激過(guò)程中發(fā)揮的作用及其機(jī)制。方法用薄荷醇及冷空氣(18℃)刺激人氣道上皮16HBE細(xì)胞:1以TRPM8通道特異性拮抗劑BCTC、TRPM8 shRNA為干預(yù)手段,動(dòng)態(tài)觀察在薄荷醇、冷刺激作用下細(xì)胞內(nèi)Ca2+熒光強(qiáng)度變化來(lái)監(jiān)測(cè)氣道上皮細(xì)胞上TRPM8的功能;2以磷脂酰肌醇4,5-二磷酸(phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate,PIP2)熒光分子探針PLCδ1-PH-GFP轉(zhuǎn)染細(xì)胞,通過(guò)動(dòng)態(tài)觀察各組細(xì)胞內(nèi)PLCδ1-PH-GFP從細(xì)胞膜至細(xì)胞質(zhì)的熒光轉(zhuǎn)位變化來(lái)檢測(cè)PIP2的動(dòng)態(tài)變化來(lái)研究冷刺激作用下TRPM8的信號(hào)通路。結(jié)果 1細(xì)胞內(nèi)相對(duì)鈣離子濃度變化:薄荷醇組處理4 min后、冷刺激組處理6 min后分別為(5.80±0.34)、(5.02±0.36),明顯高于對(duì)照組(1.04±0.12)、(1.03±0.08)(P0.05),1 mmol/L薄荷醇組+BCTC組、1 mmol/L薄荷醇組+轉(zhuǎn)染TRPM8 shRNA組最高值分別為(2.68±0.19)、(1.08±0.16),明顯低于1 mmol/L薄荷醇組,18℃+BCTC組、18℃+轉(zhuǎn)染TRPM8 shRNA組最高值分別為(1.77±0.22)、(1.02±0.18),明顯低于18℃組(均P0.05);2PLCδ1-PH-GFP從細(xì)胞膜至細(xì)胞質(zhì)的轉(zhuǎn)位變化(Fm/Fc值):1 mmol/L薄荷醇組、冷刺激組最高值分別為(0.90±0.01)、(0.90±0.01),明顯高于對(duì)照組最高值(1.01±0.02)(P0.05),細(xì)胞處理200 s時(shí)1 mmol/L薄荷醇+BCTC15μmol/L組、1 mmol/L薄荷醇組+轉(zhuǎn)染TRPM8 shRNA組分別為(0.86±0.03)、(0.89±0.02),明顯低于1 mmol/L薄荷醇組(0.36±0.06)(P0.05),細(xì)胞處理220 s時(shí)18℃+BCTC15μmol/L組、18℃+轉(zhuǎn)染TRPM8 shRNA組分別為(0.82±0.02)、(0.93±0.01),明顯低于18℃組(0.40±0.06)(P0.05)。結(jié)論TRPM8受體是人氣道上皮細(xì)胞感受冷刺激的主要受體,并通過(guò)TRPM8→Ca2+→PLC→PIP2信號(hào)通路引起氣道黏液高分泌等反應(yīng)。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院呼吸內(nèi)科;Far
【關(guān)鍵詞】： 氣道上皮細(xì)胞 冷刺激 瞬時(shí)受體電位蛋白- Ca+ PIP
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81370111,81270102) 重慶市自然科學(xué)基金(CSTC2012jjA10050) 重慶市教委科學(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目(KJ120301)~~
【分類(lèi)號(hào)】：R322.3
【正文快照】： 冷空氣刺激是引起慢性氣道炎癥性疾病(如慢性阻塞性肺疾病、哮喘等)加重的一個(gè)重要環(huán)境因素[1-2],吸入冷空氣可以使該類(lèi)患者咳嗽、支氣管痙攣、黏液分泌等癥狀加重。所以,研究人氣道上皮細(xì)胞感受冷刺激的作用機(jī)制對(duì)于預(yù)防該類(lèi)患者病情加重有很重要的意義。近年來(lái),大量研究發(fā)現(xiàn)

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：578244