本文關(guān)鍵詞：增強型綠色熒光蛋白標記兔間充質(zhì)干細胞體外復(fù)合小腸黏膜下層的生長特性

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【摘要】：目的利用綠色熒光蛋白(EGFP)標記兔來源的骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSC),觀察其作為種子細胞復(fù)合SIS基質(zhì)體外培養(yǎng)的生長特性,為復(fù)合物回植體內(nèi)時間提供參考。方法通過物理和化學(xué)方法制備小腸黏膜下層(SIS);取新西蘭大白兔分離BMSC,體外培養(yǎng)增殖至P3代,行轉(zhuǎn)染增強型EGFP,轉(zhuǎn)染前后根據(jù)增殖速度,繪制生長曲線。然后將轉(zhuǎn)染后的第3代間BMSC,以30×106的濃度接種于1 cm×1 cm大小的SIS支架材料上培養(yǎng)。觀察細胞轉(zhuǎn)染后的生長特性,檢測復(fù)合后的細胞總數(shù),熒光顯微鏡觀察復(fù)合后細胞形態(tài)。結(jié)果 BMSC經(jīng)轉(zhuǎn)染后生長增殖速度未受明顯影響。細胞DNA檢測顯示復(fù)合物培養(yǎng)第7天培養(yǎng)結(jié)果顯示細胞增殖狀態(tài)最佳差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。熒光顯微鏡觀察顯示復(fù)合物培養(yǎng)7天細胞增殖良好差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),第10天后呈現(xiàn)老化狀態(tài)。結(jié)論增強型的EGFP轉(zhuǎn)染不影響間充質(zhì)干細胞傳代以及增殖。間充質(zhì)干細胞-SIS基質(zhì)復(fù)合物體外培養(yǎng)7 d回植較為合適。
【作者單位】： 西安交通大學(xué)第二附屬醫(yī)院骨科;西安市中心醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 間充質(zhì)干細胞 腸黏膜 綠色熒光蛋白質(zhì)類
【基金】：陜西省科技攻關(guān)項目資助(2011K12-72)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 隨著組織工程的發(fā)展,支架材料成為其研究的核心內(nèi)容之一。小腸黏膜下層(the smallintestinal submucosa,SIS)是從豬空腸黏膜下層分離出的無細胞膠原層,是天然的細胞外基質(zhì)類材料,無免疫性,作為可吸收支架和基質(zhì)材料已廣泛應(yīng)用于多種組織的修復(fù),如肌腱、半月板和骨缺損的修復(fù)[1

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本文編號：573356