本文關(guān)鍵詞：IL-31單克隆抗體的制備及ELISA檢測方法的建立

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【摘要】：目的:制備抗人IL-31單克隆抗體,建立ELISA檢測體系。方法:采用合成免疫原免疫BALB/c小鼠,通過雜交瘤技術(shù)制備抗IL-31單克隆抗體,用HRP標記單克隆抗體,ELISA和Western blot法檢測抗體的亞類、滴度和特異性;采用ELISA技術(shù)制備IL-31檢測試劑盒,并對自制試劑盒進行評價。結(jié)果:獲得了兩株穩(wěn)定產(chǎn)生抗IL-31單克隆抗體的雜交瘤細胞,抗體亞類均為IgG3,抗體特異性好,雜交瘤細胞誘生的腹水抗體效價達106。試劑盒檢測靈敏度為5.726 pg/ml,檢測IL-1、IL-6、TNF-α、RF的P/N值均小于2.1,為陰性,靶抗原IL-31的檢測結(jié)果為陽性(P/N值=13.76);自制試劑盒檢測特應性皮炎血清IL-31水平為(532.83±90.39)pg/ml,對照組血清IL-31水平為(103.31±19.17)pg/ml,皮炎組明顯高于對照組,有顯著性差異(P0.001)。結(jié)論:成功制備了抗IL-31單克隆抗體,建立的ELISA試劑盒可用于臨床檢測IL-31。
【作者單位】： 遵義醫(yī)學院第三附屬醫(yī)院骨科;遵義醫(yī)學院珠海校區(qū)免疫學教研室;遵義醫(yī)學院附屬醫(yī)院檢驗科;
【關(guān)鍵詞】： IL- 單克隆抗體 ELISA
【基金】：國家自然科學基金資助項目(No.81260266) 貴州省科技攻關(guān)項目(No.黔科合NY20063039號) 貴州省優(yōu)秀科技教育人才省長專項資金項目(No.黔省專合200951號)
【分類號】：R392-33
【正文快照】： 白細胞介素31(Interleukin-31,IL-31)是近年發(fā)現(xiàn)的具有4個螺旋結(jié)構(gòu)的多肽鏈,為Th2型細胞因子,具有調(diào)節(jié)細胞增殖分化、促進造血、參與炎癥反應等多種生物學功能,是一種重要的炎癥因子,在炎癥反應和過敏性疾病中發(fā)揮重要的作用[1]。我們在前期研究中發(fā)現(xiàn)IL-31可誘導皮膚炎癥反應

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本文編號：573332