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Ghrelin以非經(jīng)典受體依賴性方式促進(jìn)人胚胎干細(xì)胞定向分化為心肌細(xì)胞的研究

發(fā)布時(shí)間:2017-07-13 20:20

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【摘要】:目的探討Ghrelin對(duì)人胚胎干(hES)細(xì)胞定向分化為心肌細(xì)胞的影響。方法以不同濃度Ghrelin誘導(dǎo)hES細(xì)胞定向分化為心肌細(xì)胞,顯微鏡下計(jì)數(shù)搏動(dòng)細(xì)胞團(tuán)的比例,應(yīng)用實(shí)時(shí)PCR檢測(cè)心肌特異性標(biāo)志物的表達(dá)。應(yīng)用RT-PCR、Western blot及免疫熒光染色檢測(cè)分化細(xì)胞中生長(zhǎng)激素促分泌物受體1α(GHS-R1α)的表達(dá),添加GHS-R1α拮抗劑[D-lys3]-GHRP-6,觀察其對(duì)Ghrelin促分化作用的影響。結(jié)果與對(duì)照組比較,10-10、10-9及10-8 mol/L Ghrelin均可增加搏動(dòng)細(xì)胞團(tuán)的比例[搏動(dòng)比例分別為(12.9±1.4)%,(19.5±2.2)%及(13.5±3.1)%vs(10.3±2.2)%,P0.05]。RT-PCR分析顯示,Ghrelin可上調(diào)α-肌球蛋白重鏈(α-MHC)和心肌肌鈣蛋白I(cTnI)的表達(dá)[α-MHC:100%vs(40.1±13.2)%,P0.001;cTnI:100%vs(52.6±9.8)%,P0.001]。RT-PCR、Western blot及免疫熒光染色均顯示GHS-R1α在不同階段的分化細(xì)胞中表達(dá),但;头酋;疓hrelin的促分化作用相似,且添加GHS-R1α拮抗劑不能阻斷Ghrelin的促分化作用。結(jié)論 Ghrelin可促進(jìn)hES細(xì)胞定向分化為心肌細(xì)胞,該作用可能由GHS-R1α以外的信號(hào)途徑所介導(dǎo)。
【作者單位】: 北京大學(xué)第三醫(yī)院內(nèi)分泌科 臨床干細(xì)胞研究中心;
【關(guān)鍵詞】Ghrelin 人胚胎干細(xì)胞 心肌細(xì)胞 分化
【基金】:國(guó)家973計(jì)劃(2012CB517502) 國(guó)家自然科學(xué)基金(81070701、81000315、81270858) 高等教育博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金(20100001110083、20120001120063、20120001120076)
【分類號(hào)】:R329.2
【正文快照】: Ghrelin是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的生長(zhǎng)激素促分泌物受體(GHS-R)的內(nèi)源性配體[1]。Ghrelin主要由胃腸道合成和分泌,大鼠胃的X/A樣細(xì)胞(人類為P/D1細(xì)胞)是其主要來(lái)源[2]。GHS-R屬于G蛋白偶聯(lián)受體,分為GHS-R1α和GHS-R1β亞型,其中,1α亞型是Ghrelin受體功能的主要形式。新近的研究提示可

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):538286

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