大鼠唾液腺細胞體外原代培養(yǎng)的一種新方法
本文關鍵詞:大鼠唾液腺細胞體外原代培養(yǎng)的一種新方法
更多相關文章: 唾液腺 腮腺上皮細胞 原代培養(yǎng) 組織塊培養(yǎng)法 大鼠
【摘要】:目的:建立大鼠唾液腺上皮細胞體外原代培養(yǎng)模型,為體外研究唾液腺疾病提供種子細胞。方法 :在無菌條件下取出生1~2 d的Wistar大鼠腮腺組織,手術顯微鏡下去除腺體包膜,以無血清培養(yǎng)基(kerotinocyte-SFM)為培養(yǎng)液,并添加表皮生長因子(rat epidermal growth factor,r EGF)、牛垂體提取物(bovine pituitary extract,BPE)、氫化可的松(hydrocortisone,HC)、轉鐵蛋白(transferrin,Tf)、胰島素(insulin,INS)等因子,應用組織塊培養(yǎng)法進行培養(yǎng)。用倒置相差顯微鏡觀察培養(yǎng)細胞體外生長的形態(tài)特征。用H-E染色及細胞角蛋白、波形蛋白免疫組織化學染色對培養(yǎng)的細胞進行形態(tài)學檢查和鑒定。結果:培養(yǎng)的腮腺上皮細胞為三角形、多邊形、圓形、短梭形,細胞單層生長,連接疏松。H-E染色可見細胞多為圓形,核藍染,細胞有突起、細胞間橋。細胞角蛋白染色陽性,證實所培養(yǎng)細胞為上皮來源;Vimentin、actin和calponin染色細胞大部分呈陽性,進一步確定細胞主要為肌上皮細胞。原代細胞在3~5 d內保持良好的生長狀態(tài),并存活1周左右。結論:組織塊培養(yǎng)法可以簡捷、快速地獲得大鼠腮腺上皮細胞,成功建立Wistar大鼠腮腺上皮細胞的體外模型。
【作者單位】: 廣西醫(yī)科大學附屬口腔醫(yī)院口腔頜面外科;
【關鍵詞】: 唾液腺 腮腺上皮細胞 原代培養(yǎng) 組織塊培養(yǎng)法 大鼠
【基金】:國家自然科學基金(30960420) 廣西醫(yī)療衛(wèi)生重點科研課題(桂衛(wèi)重2010082)~~
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 目前,放療已成為治療頭頸部惡性腫瘤的主要手段之一,放療后引發(fā)的口干、齲齒、放射性骨髓炎等并發(fā)癥已嚴重影響患者的后期生活質量。其中,放射性口干癥愈來愈引起國內外學者的普遍關注。人們對唾液腺放射損傷的研究大多以大鼠、恒河猴等[1-2]動物作為研究模型,因其應用簡便,更
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