本文關(guān)鍵詞：不同濃度血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞向心肌細胞的定向分化

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【摘要】：背景:血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞向心肌細胞定向分化的實驗研究還較少,目前對于這種新的誘導(dǎo)劑在實驗應(yīng)用中沒有一個統(tǒng)一的濃度標準,所以誘導(dǎo)結(jié)果有一定的差異。目的:探討血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞分化為心肌細胞的最佳濃度。方法:采用密度梯度離心+貼壁法分離培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞,將第3代骨髓間充質(zhì)干細胞分為0.05,0.1,0.2,0.5μmol/L血管緊張素Ⅱ組和對照組,血管緊張素Ⅱ各組接種后24 h加相應(yīng)的誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)24 h后,完全培養(yǎng)液連續(xù)培養(yǎng)4周,對照組只用完全培養(yǎng)液培養(yǎng)。采用MTT法檢測各組第1,3,5,7天的吸光度值,計算各誘導(dǎo)組的細胞增殖抑制率。不同濃度血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)第1,4周時,免疫熒光細胞化學(xué)染色法檢測心肌特異蛋白c Tn T、β-MHC的表達,RT-PCR檢測各組誘導(dǎo)培養(yǎng)4周時心肌早期轉(zhuǎn)錄因子GATA-4、Nkx2-5的表達。結(jié)果與結(jié)論:各誘導(dǎo)組間的細胞增殖曲線相似,第5天0.05μmol/L血管緊張素Ⅱ組細胞增殖抑制率開始出現(xiàn)負值,與其他組比較差異有顯著性意義(P0.05)。第5,7天0.1μmol/L血管緊張素Ⅱ組細胞增殖抑制率明顯低于0.2,0.5μmol/L血管緊張素Ⅱ組(P0.05)。經(jīng)4種濃度血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的骨髓間充質(zhì)干細胞均表達心肌特異蛋白c Tn T、β-MHC,對照組陰性。誘導(dǎo)培養(yǎng)1周,0.5μmol/L血管緊張素Ⅱ組c Tn T、β-MHC蛋白陽性表達率明顯高于0.05μmol/L組(P0.05)。誘導(dǎo)培養(yǎng)4周,0.1μmol/L血管緊張素Ⅱ組的c Tn T、β-MHC蛋白陽性表達率與0.2μmol/L血管緊張素Ⅱ組差異無顯著性意義(P0.05)。RT-PCR檢測各組骨髓間充質(zhì)干細胞經(jīng)不同濃度血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)培養(yǎng)4周后心肌早期轉(zhuǎn)錄因子GATA-4、Nkx2-5均有表達,對照組陰性。結(jié)果表明經(jīng)血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的骨髓間充質(zhì)干細胞表達心肌特異蛋白c Tn T、β-MHC及心肌特異轉(zhuǎn)錄因子GATA-4、Nkx2-5,誘導(dǎo)分化適宜濃度為0.1μmol/L。
【作者單位】： 山西醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院心胸外科;
【關(guān)鍵詞】： 骨髓 間質(zhì)干細胞 肌細胞 心臟 血管緊張素Ⅱ 干細胞 骨髓干細胞 心肌樣細胞 誘導(dǎo)分化
【基金】：山西省科技攻關(guān)項目資助(20120313021-3) 山西省留學(xué)歸國人員科研項目資助(2012091)~~
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 0引言Introduction心肌細胞屬于終末細胞,壞死后無法再生,所以對于缺血性心臟病的治療存在一定的難度。但是,近年來基于骨髓間充質(zhì)干細胞進行心肌修復(fù)的研究已經(jīng)有所成就[1-7],骨髓間充質(zhì)干細胞已成為心肌組織工程中最有潛能的種子細胞。大量體外實驗已經(jīng)表明大鼠骨髓間充質(zhì)干

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【相似文獻】

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本文編號：521190